视网膜母细胞瘤类器官的细胞周期与联合药物反应
用患者来源类器官比较 3 种化疗药及联合方案，结合细胞周期、凋亡和增殖肿瘤细胞计数分析药物作用。
用途与模型
- 研究用途
- 比较视网膜母细胞瘤眼内治疗相关药物的浓度、时间及联合作用。
- 模型与细胞来源
- 未接受化疗的晚期视网膜母细胞瘤组织；6 份样本中建立 5 个类器官系，药物验证使用选定低代次模型。
- 方法版本
- 2018 年患者肿瘤、24/72 小时化疗比较版本
- 实验形式
- Matrigel 三维培养；小于第 5 代类器官接受 24 或 72 小时药物处理。
材料与平台
- 肿瘤与基质
- 患者肿瘤细胞、Matrigel、含 EGF/FGF2 的神经培养体系。
- 单药与组合
- 美法仑 8/16/32 μM、拓扑替康 11 μM、甲氨蝶呤 275 μM；联合为美法仑 16 μM 加拓扑替康 11 μM。
- 检测
- 细胞周期分析；裂解型 caspase-3 凋亡染色；RXRγ 与 Ki67 共同染色识别增殖中的视锥细胞样肿瘤细胞。
测量指标与分析
- 细胞周期分布与亚 G1 比例
- caspase-3 阳性细胞比例
- RXRγ/Ki67 双阳性细胞比例
- 增殖肿瘤细胞在 RXRγ 阳性群中的比例
按单药、组合和溶剂对照比较 24/72 小时的周期与凋亡结果；24 小时再分层计数视锥细胞样肿瘤细胞及其增殖亚群。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 在选定类器官中比较单药浓度、两种时间窗及联合处理；以组织学、标志染色和分子资料表征模型。
- 测试范围
- 6 份肿瘤中成功建立 5 个类器官系；药物结果图标注 n = 3。
- 参照体系
- 溶剂对照、3 种化疗单药，以及美法仑/拓扑替康联合组；原肿瘤作模型表征参照。
- 研究结果
- 拓扑替康与联合组较快减少增殖中的视锥细胞样肿瘤细胞；联合组比美法仑单药作用更强。美法仑低浓度主要先引起周期阻滞，延长暴露后细胞死亡增加。
适用条件与研究局限
- 药物实验基于选定低代次模型，未覆盖所有建立的类器官系。
- 培养可富集原肿瘤亚克隆，存在组织与培养间的分子差异。
- 临床一致性依据既有治疗资料对照。
来源与原文
- A three-dimensional organoid model recapitulates tumorigenic aspects and drug responses of advanced human retinoblastoma原始研究 · Scientific Reports · 2018-10-23