NAMs新方法学前沿

视网膜类器官的莫西沙星 24 小时毒性检测

LDH 随浓度增加,100/300 µg/mL 凋亡相关细胞标志增加,RCVRN/CRX/AP2-α下降而 MITF 未变。

用途与模型

研究用途
在分层人源视网膜模型中同时检查药物引起的组织损伤、凋亡相关变化及细胞类型标志。
模型与细胞来源
健康来源 WT2 iPSC 分化 150 天的视网膜类器官;五个细胞系的总体分化检查与此单系给药分开。
方法版本
2018-08-13 原研究相关主文
实验形式
三维类器官;24 小时药物处理后检查组织与培养液。

材料与平台

给药对象
WT2 第 150 天类器官,莫西沙星 50、100、300、700 和 1000 µg/mL,24 小时。
损伤检测
培养液 LDH、组织形态及 caspase-3 表达。
细胞类型检查
RCVRN、CRX、AP2-α、MITF 等细胞标志及 DR5/p21 相关表达。

测量指标与分析

  • LDH 释放
  • 组织空隙/结构
  • caspase-3 表达
  • 光感受器/无长突细胞/RPE 标志

将形态、培养液损伤指标与不同细胞类型的表达结果分别解释,检查浓度依赖变化。

研究设计与结果

方法可行性研究

研究设计
不同莫西沙星浓度与未处理参照;不同标志反映的细胞组分。
测试范围
药物试验限定 WT2;主文说明给药对象与时间,未提供可直接用于供者间比较的药物反应分组。
参照体系
不同莫西沙星浓度与未处理参照;不同标志反映的细胞组分。
研究结果
LDH 随浓度增加,100/300 µg/mL 凋亡相关细胞标志增加,RCVRN/CRX/AP2-α下降而 MITF 未变。

适用条件与研究局限

  • 150 天模型仍具发育阶段特征;整体分化评价含五个细胞系,给药结果对应 WT2 单系。
  • 分泌组另述 100 µM,不与µg/mL 给药条件合并。
  • 药物结果对应单一细胞系,研究未给出供者间反应比较或临床无毒阈值。

来源与原文

  1. Human-Induced Pluripotent Stem Cells Generate Light Responsive Retinal Organoids with Variable and Nutrient-Dependent Efficiency原始研究 · Stem Cells · 2018-08-13

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