NAMs新方法学前沿

视网膜类器官的免疫抑制药物影响分析

用荧光寿命成像和表达分析,比较他克莫司、霉酚酸及组合对视网膜类器官的代谢和发育标志的影响。

用途与模型

研究用途
评价拟用于细胞移植的免疫抑制方案对供体视网膜组织材料的直接影响。
模型与细胞来源
CSC14 人胚胎干细胞来源视网膜类器官,采用两个分化阶段的批次。
方法版本
2025 年 CSC14 来源视网膜类器官体外药物研究
实验形式
悬浮类器官药物暴露;两个批次分别在 1 周和 4 周后进行 FLIM,4 周后进行 qPCR。

材料与平台

CSC14 与视网膜类器官
人胚胎干细胞来源;本药物实验两批在分化第 68 和 87 天开始。
FLIM 与 qPCR
内源 NADH 荧光寿命分析,以及视网膜前体和光感受器相关表达分析。

测量指标与分析

  • 游离/结合 NADH 比值
  • 14 个视网膜前体和光感受器相关基因表达

在同批次和同时间点比较药物与未处理对照;代谢与表达分别判断。

研究设计与结果

实验条件比较

研究设计
他克莫司、霉酚酸、两药组合及未处理对照;两批次、两个 FLIM 时间点。
测试范围
FLIM 每处理组 4 个类器官;qPCR 每样本集含 3–5 个类器官,不能把混合样本数量当独立供者数量。
参照体系
同一批次未处理类器官;分化标志表征另有胎儿/成人视网膜参考。
研究结果
药物组与对照的游离/结合 NADH 比值未见显著差异;单药表达接近对照,组合处理 CRX 和 NRL 表达降低。

适用条件与研究局限

  • 该条只登记体外药物影响实验,动物移植、视觉恢复和免疫抑制剂剂量结果未合并。
  • 两个分化批次来自该 hESC 平台,未提供多供者或跨实验室预测验证。

来源与原文

  1. Effect of immunosuppression on hESC-derived retina organoids in vitro and in vivo原始研究 · Stem Cell Research & Therapy · 2025-04-05

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