ALT 视网膜类器官的外节与患者表型评价
以培养条件比较检查光感受器外节比例、长度与膜盘，并检查 RPGR 患者模型可辨认的细胞表型。
用途与模型
- 研究用途
- 改善治疗研究中视网膜模型的结构成熟度和可比较表型。
- 模型与细胞来源
- 人多能干细胞（human pluripotent stem cells，hPSC）来源视网膜类器官，主要量化来自 H9；患者部分为 3 位 RPGR 相关患者的诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cells，iPSC）与 3 株健康对照。
- 方法版本
- 原论文实际模型质量评价版本
- 实验形式
- 第 12 周起比较 RDM90 与 ALT 长期培养条件，分别设置白蛋白或白蛋白结合二十二碳六烯酸（docosahexaenoic acid，DHA）。
材料与平台
- 模型与支持
- 人源视网膜类器官、抗氧化/脂质支持、白蛋白及 DHA 条件。
- 结构检测
- 内外节蛋白、段长度与结构比例、透射及扫描电镜、连续切片三维重建。
- 疾病指标
- RPGR 位置、GFAP 反应、视紫红质分布及肌动蛋白染色。
测量指标与分析
- 外节样结构/内节比例
- 总段长度和视锥段形成
- 膜盘结构
- RPGR、GFAP 与视紫红质分布
分别按年龄、培养条件、图像及分化次数分析；结构和光响应性能分开。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 第 12 周起比较 RDM90 与 ALT 长期培养条件，白蛋白或白蛋白结合 DHA 分别设置。
- 测试范围
- 26 周比例 30 图像/3 次分化，长度 40 图像/4 次分化；患者 3 株与健康 3 株。
- 参照体系
- 常规 RDM90、对应白蛋白条件及健康细胞背景。
- 研究结果
- ALT 提高外节样比例与长度，出现较有序膜盘；晚期光学观察 DHA 无额外显著改善。患者蛋白错位和 GFAP 变化可辨认，肌动蛋白差别未见。
适用条件与研究局限
- 并非全部细胞形成成熟膜盘，未重现完整色素上皮支持。
- 未直接测定更强光响应。
来源与原文
- Antioxidant and lipid supplementation improve the development of photoreceptor outer segments in pluripotent stem cell-derived retinal organoids原始研究 · Stem Cell Reports · 2022-03-24