IFN-γ 心肌成熟的钙成像与场电位评价
结合代谢分层、肌节、钙信号和场电位，检验 IFN-γ 的成熟作用及 JAK 抑制参照。
用途与模型
- 研究用途
- 评价供后续疾病及药物研究使用的人干细胞心肌成熟状态。
- 模型与细胞来源
- 主要为 H7 与 ES03 人胚胎干细胞（human embryonic stem cells，hESC）来源心肌细胞；另有 G608G 诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cells，iPSC）来源心肌细胞的场电位比较。
- 方法版本
- 原研究所载实验版本
- 实验形式
- IFN-γ 处理 3、7 或 10 天，并分别加入 0.1 或 1 μM 芦可替尼比较。
材料与平台
- 培养干预
- 干扰素 γ（interferon gamma，IFN-γ）25 ng/mL；相应未处理及芦可替尼联合组。
- 钙信号
- 既有 GCaMP6s 钙荧光报告细胞，检测钙峰、持续时间、上升与回落。
- 结构和电活动
- 肌节与 α-actinin Z 线、MYH7/MYH6 表达，以及多电极阵列（multielectrode array，MEA）场电位。
测量指标与分析
- 钙峰及时间指标
- 场电位峰间幅度与上升速率
- 搏动间期
- 肌节结构
按来源、时间、药物浓度和检测指标分别比较；钙荧光与胞外场电位分别分析。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- IFN-γ 处理 3、7 或 10 天，并分别加入 0.1 或 1 μM 芦可替尼比较。
- 测试范围
- H7、ES03 两个 hESC 背景为主要实验；部分 MEA 包括额外 iPSC 背景。
- 参照体系
- 未处理、IFN-γ 单用及 IFN-γ 联合两浓度芦可替尼。
- 研究结果
- IFN-γ 改善多类成熟指标；钙成像中 1 μM 芦可替尼削弱其作用，0.1 μM 没有同样明显影响，MEA 呈剂量依赖。
适用条件与研究局限
- 不同检测对浓度的响应不同。
- 主要细胞为两个 hESC 系来源，额外 iPSC 系只用于部分功能比较。
- 验证范围为细胞成熟质量及通路依赖。
来源与原文
- Upregulation of the JAK-STAT pathway promotes maturation of human embryonic stem cell-derived cardiomyocytes.原始研究 · Stem Cell Reports · 2021-11-11