流体装置内肿瘤球的伊立替康渗透与代谢成像
组合培养液药物定量和球体切片质谱成像，分析原药与 SN-38 的分布。
用途与模型
- 研究用途
- 研究三维肿瘤细胞模型的药物进入速度和局部代谢。
- 模型与细胞来源
- HCT 116 人结直肠癌球状体，起始 6000 细胞/球，第 12–14 天直径约 1 mm。
- 方法版本
- 原研究所载版本
- 实验形式
- 多孔膜培养插入装置连接 3D 打印流体通道。
材料与平台
- 暴露
- 球体培养区 100 μL，通道流速 15 μL/min；渗透和代谢分别采用 50 和 75 μM 伊立替康；加药实验在室温进行。
- 培养区定量
- 在 0、3、6、9、12、21、24、30 小时取样，液相色谱—多重反应监测质谱定量培养区伊立替康。
- 空间成像
- 24 小时处理后 MALDI-IMS 观察球体切片，以 35 μm 采样间距生成原药与 SN-38 离子分布图。
测量指标与分析
- 培养区伊立替康浓度时间曲线
- 球体原药离子信号分布
- SN-38 离子信号分布
先确认药物通过膜进入培养区，再分析同一类球体中原药与代谢产物位置；空间质谱信号与细胞活力分开解释。
研究设计与结果
方法可行性研究
- 研究设计
- 检查透膜药物输入及一种药物的三维空间分布。
- 测试范围
- 一个 HCT 116 细胞系的球状体。
- 参照体系
- 未加药球体的质谱背景与输入 50 μM 药物浓度。
- 研究结果
- 培养区约 9 小时达到 50 μM 平台；24 小时原药集中核心、SN-38 主要在外缘。
适用条件与研究局限
- 加药在室温进行，当前浓度曲线为上升后平台。
- 本次验证采用一个细胞系和一种药物。