NAMs新方法学前沿

心肌动作电位与钙信号的同步成熟评价

在微沟槽基底培养模型中同步记录膜电位和钙,比较时间与药物响应。

用途与模型

研究用途
检验心肌模型的基础电生理及药物功能反应。
模型与细胞来源
一条对照 iPSC 来源心肌;成人手术心肌细胞作为参照。
方法版本
原研究所载版本
实验形式
FluoVolt/Cal630 双波长成像,与成人膜片钳/钙荧光比较。

材料与平台

时间与温度
iPSC 主要光学比较第 60、75、90 天,37±1°C 测量,比较 1/2 Hz 刺激。
测量
90 帧/秒,同时膜电位与钙荧光;稳态平均 5–10 个连续波形,计算半复极时程、钙幅及衰减时间。
药物
第 90 天用 1 μM 异丙肾上腺素或福斯可林,比较处理前后钙幅度与恢复速度。

测量指标与分析

  • 动作电位半复极时程
  • 钙瞬变幅度与衰减
  • 刺激频率适应
  • 暂停后钙增强

同步记录同一细胞的动作电位与钙信号,分别比较培养时点和成人参照;各项测量的供者人数、分化批次和细胞数分别报告。

研究设计与结果

药物集评价

研究设计
比较成熟时序、成人功能参照及两种 cAMP 相关干预。
测试范围
Fig5:ISO 为 2 次分化 7 细胞,FSK 为 2 次分化 21 细胞;成人 ISO 为 5 患者 12 细胞。
参照体系
同一模型基础状态、较早培养时点与成人心肌。
研究结果
第 90 天频率适应更明显;ISO/FSK 增强钙并加快下降;iPSC 的 ISO 半复极时程缩短 12% 未显著。

适用条件与研究局限

  • 单 iPSC 线,仍存在胎儿样蛋白/收缩特征。
  • 成人手术组织参照采用不同记录方式。
  • 不同时间点为分组取样,非同一细胞长期追踪。

来源与原文

  1. Optical Investigation of Action Potential and Calcium Handling Maturation of hiPSC-Cardiomyocytes on Biomimetic Substrates.原始研究 · International Journal of Molecular Sciences · 2019-08-03

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