KIM-Plate 肝—MCF7 共培养的代谢物暴露—反应比较
比较持续肝—癌共培养、静态/灌流条件培养液与单培养，分析代谢物总暴露和时间模式对药物反应的影响。
用途与模型
- 研究用途
- 比较持续肝—癌共培养、静态/灌流条件培养液与单培养，分析代谢物总暴露和时间模式对药物反应的影响。
- 模型与细胞来源
- PXB 人肝细胞与 MCF7 人乳腺癌细胞分别置于开放培养室，通过循环培养液形成肝—癌微生理系统；PXB 细胞从人源化肝嵌合小鼠中分离。
- 方法版本
- 2026 年原研究；2026-09-05
- 实验形式
- 先比较四种无药培养条件、肝细胞代谢和 MCF7 单培养药物反应，再比较两类条件培养液与持续共培养；以单培养资料估算暴露并与共培养活力对照。
材料与平台
- 细胞
- PXB 人肝细胞与 MCF7 乳腺癌细胞系；并非患者配对模型。
- 比较对象
- 伊立替康（irinotecan，CPT-11）前药、SN-38 活性代谢物和 SN-38 葡萄糖醛酸结合物；培养平台保持可分别测量 MCF7。
测量指标与分析
- MCF7 细胞计数试剂盒（Cell Counting Kit-8，CCK-8）的相对信号与归一化细胞活力
- 原药/代谢物浓度—时间关系
- SN-38 暴露曲线下面积（area under the curve，AUC）
- 浓度或 AUC 对应的拟合 GI50
灌流下 SN-38 的拟合 GI50 较静态低约 6.3 倍；持续共培养的实测活力约 57%，高于暴露模型估算约 38%。相近 AUC 下递增 SN-38 暴露的表观抑制作用较弱。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 先比较四种无药培养条件、肝细胞代谢和 MCF7 单培养药物反应，再比较两类条件培养液与持续共培养；以单培养资料估算暴露并与共培养活力对照。
- 测试范围
- 一个肝细胞来源类型与一个癌细胞系组合。补充表 S2 列出：无药各组 n=10—12；肝单培养代谢两条件各 n=3；Fig4E 静态条件培养液、灌流条件培养液、持续共培养分别 n=17、10、19。n 指独立培养孔或芯片单元，不是独立人供者；代谢浓度取自单次培养实验中的独立单元，其余多次实验汇总。
- 参照体系
- 静态与灌流单培养、静态与灌流条件培养液、持续肝—癌共培养及各自条件匹配无药对照；另比较相近 AUC 的恒定与递增 SN-38 暴露。
- 研究结果
- 灌流下 SN-38 的拟合 GI50 较静态低约 6.3 倍；持续共培养的实测活力约 57%，高于暴露模型估算约 38%。相近 AUC 下递增 SN-38 暴露的表观抑制作用较弱。
适用条件与研究局限
- 药效共培养中的浓度未直接测量，使用肝细胞单培养代谢数据推算。
- CCK-8 为活细胞相对代谢信号，不是直接绝对细胞计数。
- 只有一个癌细胞系—药物关系，未含全身分布/排泄或临床暴露完整过程。
- 多种共培养与灌流因素不能逐一分离，不宣称唯一因果机制。