NAMs新方法学前沿

IPF 肺泡基底细胞的蜂窝样类器官评价

以 IPF 患者肺泡区域基底细胞建立三维类器官,检查蜂窝样上皮的细胞组成、极性腔体及黏液特征。

用途与模型

研究用途
研究蜂窝样结构形成及未来药物抑制的模型基础,当前版本为疾病模型和质量评价。
模型与细胞来源
IPF 患者移植肺组织来源的肺泡区域基底细胞,非正常肺泡Ⅱ型细胞类器官。
方法版本
2024 年患者肺泡基底细胞/21 天三维培养版本
实验形式
Matrigel 三维培养 21 天,并与 23 天气液界面培养及患者肺组织比较。

材料与平台

细胞与基质
患者肺泡区域基底细胞及 Matrigel;主要实验使用早期传代细胞。
质量检测
基底、分泌和纤毛相关 RNA/免疫染色、类器官数量与直径、极化腔体和黏液观察。
参照
患者肺组织与非纤维化肺组织的细胞标志比较;冻存/传代和分化前后另作质量比较。

测量指标与分析

  • 类器官数/mm³与直径
  • 极化腔体比例
  • 基底、分泌及纤毛相关标志
  • MMP7 及黏液分布

按患者、选取区域和类器官各层级报告;检查培养前后及传代/冻存状态,区别疾病组织参照与培养对照。

研究设计与结果

方法可行性研究

研究设计
4 名 IPF 患者来源类器官的形成、空间组织和标志检测,并与 ALI 及原疾病组织特征对照。
测试范围
Fig5 为 4 名患者;第 20 天每人 3 个区域计数,第 21 天图像定量每人 10 个类器官。
参照体系
分化前基底细胞、气液界面培养和 IPF 组织组成;无对应的非纤维化肺泡基底细胞培养对照。
研究结果
第 20 天约 43–100 个类器官/mm³、直径 50–280µm;第 21 天约 40% 有极化腔体,并呈基底/分泌/纤毛相关细胞分布和黏液。

适用条件与研究局限

  • 当前没有抗纤维化治疗药物筛选结果。
  • 缺乏对应正常肺泡基底细胞培养对照。
  • MMP7 的具体细胞来源尚未确定。

来源与原文

  1. The use of cultured human alveolar basal cells to mimic honeycomb formation in idiopathic pulmonary fibrosis原始研究 · Respiratory Research · 2024-01-10

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