受控流动下的人肝细胞共培养与脂毒性药物评价
通过脂滴、糖代谢、炎症分泌和脂质组比较早期脂肪性肝炎及药物反应。
用途与模型
- 研究用途
- 观察代谢风险因素诱导的肝脏病理变化，并评价奥贝胆酸的作用。
- 模型与细胞来源
- 原代人肝细胞、肝星状细胞和血液来源巨噬细胞，培养于多孔膜两侧胶原层。
- 方法版本
- 原研究所述材料与实验版本
- 实验形式
- HemoShear 装置控制培养液流动、剪切和跨膜物质交换；培养至第 10 天。
材料与平台
- 健康和脂毒性参照
- 健康组葡萄糖 5.6 mM、胰岛素 690 pM；脂毒性组 25 mM、6,900 pM，并加入油酸 65 μM 和棕榈酸 45 μM。
- 药物比较
- 脂毒性环境加入 0.5 μM 奥贝胆酸或溶剂，持续 10 天。
- 分离测量
- 肝细胞单独用于转录组、脂质组和代谢测量；整个系统培养液用于分泌蛋白检测。
测量指标与分析
- 脂质染色和脂质组
- 葡萄糖输出及胰岛素反应
- ALT 和炎症分泌因子
- α-平滑肌肌动蛋白
- 胆固醇及 ApoB
分别比较健康、脂毒性和药物组，结合患者活检的既有转录组与脂质组资料评价相似性。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 体外条件与药物比较；另以既有患者分子资料作为参照。
- 测试范围
- 药物脂质染色：1 名供者、4 次实验；脂质组：2 名供者、4 次实验；分泌因子：3 名供者、至少 5 次实验。
- 参照体系
- 健康培养、脂毒性溶剂组、既有患者活检资料。
- 研究结果
- 奥贝胆酸降低脂质积累及多项炎症指标，增加细胞内胆固醇和分泌 ApoB。
适用条件与研究局限
- 主要表现早期疾病特征，未形成晚期胶原沉积。
- 不同终点的供者与实验数不同。
- ALT、TGF-β 和骨桥蛋白的下降未达到统计学显著性。
来源与原文
- Development of an in vitro human liver system for interrogating nonalcoholic steatohepatitis原始研究 · JCI Insight · 2016-12-08