人源神经元—星形胶质—小胶质三细胞模型的通路阻断评价
TLR4/IFNγ 抗体降低 TNFα 与 NO；LPS-RS 降低 LDH；iPSC 神经细胞平行模型中 IFNγ 中和抗体减少细胞损失。
用途与模型
- 研究用途
- 比较炎症通路干预对小胶质细胞招募、炎症输出和神经培养物损伤的影响；用于靶点机制及候选干预研究。
- 模型与细胞来源
- ReNcell VM 来源神经元/星形胶质细胞与永生化人小胶质细胞；APP 变异疾病组与对照。iPSC 来源神经元/星形胶质细胞作平行验证。
- 方法版本
- 原文 2018-06-27 版本
- 实验形式
- 中央三维神经培养区与侧方小胶质细胞区经微通道连接；先培养神经细胞，再加入小胶质细胞并跟踪迁移/损伤。
材料与平台
- 人源神经元、星形胶质细胞和小胶质细胞
- 主模型神经细胞来自 ReNcell VM，小胶质细胞为永生化人源细胞系。
- TLR4 阻断抗体与 IFNγ 中和抗体
- 比较 TNFα、NO 等炎症介质；iPSC 平行模型中 IFNγ 中和抗体比较细胞损失。
- LPS-RS 与溶剂对照
- LPS-RS 处理后比较 LDH 释放；原件对浓度和稀释的记载不一致，因此此项资料仅支持已报告的损伤比较。
测量指标与分析
- 小胶质细胞迁移
- 培养液 TNFα 与 NO
- LDH 释放
- 神经元/星形胶质细胞核计数及标记面积
- 细胞类别相关免疫染色
分别比较三维疾病与对照、二维与三维、有无小胶质细胞以及干预与对应对照。主模型按 3、6、9 周培养阶段评价，iPSC 平行模型分化 3 周；核计数、标记面积和炎症介质分别分析。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 抗体或 LPS-RS 干预与疾病对照比较；神经细胞来源的平行验证单列。
- 测试范围
- 图 5 的相关比较包含 5 个培养孔或器件；图注登记至少 3 次实验。样本单位为体外培养物。
- 参照体系
- 抗体或 LPS-RS 干预与疾病对照比较；神经细胞来源的平行验证单列。
- 研究结果
- TLR4/IFNγ 抗体降低 TNFα 与 NO；LPS-RS 降低 LDH；iPSC 神经细胞平行模型中 IFNγ 中和抗体减少细胞损失。
适用条件与研究局限
- LPS-RS 的浓度与稀释记载不一致，当前结果仅支持所报告的损伤比较，不能据此确定剂量–效应关系。永生化小胶质细胞、单类疾病设定和缺少临床预测验证限制用途。
来源与原文
- A 3D Human Tri-Culture System Modeling Neurodegeneration and Neuroinflammation in Alzheimer’s Disease原始研究 · Nature Neuroscience · 2018-06-27