高糖心肌细胞模型的恩格列净处理时机比较
在相同终点比较早期与延后药物处理的收缩、钙信号和蛋白反应。
用途与模型
- 研究用途
- 观察高糖相关心肌表型及候选药物的时机差异。
- 模型与细胞来源
- 健康男性 KS1 为主要背景，健康女性 IMR90 进行部分复测；人诱导多能干细胞（iPSC）分化为心肌细胞。
- 方法版本
- 2018 年 KS1/IMR90、14 天高糖及共同/第 7 天药物版本
- 实验形式
- 14 天无胰岛素培养；IonOptix 同时记录单细胞钙和收缩。
材料与平台
- 培养分组
- 正常 5.5 mM 与高糖 22 mM 葡萄糖；恩格列净 5 μM 从开始或第 7 天加入，第 14 天终点。
- 功能检测
- fura2-AM 记录 340/380 荧光比值；10 V、1–4 Hz 电刺激；240 Hz 边缘追踪记录缩短与恢复长度。
- 附加指标
- 细胞面积、肥大/转运相关表达、受磷蛋白及 caspase；XFe24 测糖酵解相关细胞外酸化。
测量指标与分析
- 细胞缩短比例
- 缩短/恢复长度速度
- 钙瞬变幅度及衰减
- 细胞面积
- 相关基因及蛋白表达
- 细胞外酸化率
钙信号、机械运动、蛋白变化和细胞死亡分别报告；共同与延后药物处理使用各自组比较。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 正常、高糖、高糖共同药物及第 7 天起药物比较，部分指标用第二背景复测。
- 测试范围
- 主要使用 KS1 背景，部分指标在 IMR90 中复测；染色每组至少 50 个视野、约 500 个细胞，qPCR 为 6 次重复。
- 参照体系
- 正常葡萄糖、高糖未加药；共同/延后恩格列净。
- 研究结果
- 两种时机均改善部分肥大、钙和收缩；caspase-3 及受磷蛋白改善偏共同处理；高糖与共同药物糖酵解无显著差别。
适用条件与研究局限
- 本研究采用健康供者细胞，未纳入糖尿病供者。
- 不同指标对给药时机反应不同；14 天内未见明显死亡或剪切型 caspase。
- 细胞缩短比例的参照值在两个结果段落中分别为 12.7% 和 13.4%；免疫印迹重复数在统计方法中为 3，图 7 图注为 4。
来源与原文
- Empagliflozin Ammeliorates High Glucose Induced-Cardiac Dysfuntion in Human iPSC-Derived Cardiomyocytes原始研究 · Scientific Reports · 2018-10-05