HepaRG 网孔扩散系统的人肝清除率外推
结合多孔网插入物中的药物时间过程和 HepaRG 代谢，区分扩散与代谢并外推人肝清除率。
用途与模型
- 研究用途
- 进行体外到体内外推（in vitro–in vivo extrapolation，IVIVE），分析药物扩散、细胞代谢能力与人肝清除率之间的关系。
- 模型与细胞来源
- 人肝癌来源 HepaRG 细胞系培养在多孔网插入物中，外部培养液的药物经网孔进入；用经验扩散函数和室模型拟合原药及代谢物。
- 方法版本
- 2025 年双氯芬酸与睾酮、网孔扩散/代谢模型版本
- 实验形式
- 双氯芬酸/睾酮使用 508 目网；先用罗格列酮及不同网目数拟合扩散，随后固定部分扩散参数并估算代谢。
材料与平台
- 双氯芬酸
- 40 μM；每插入物 10 万、20 万或 50 万个 HepaRG 细胞，至 72 小时测原药和 4-羟基双氯芬酸。
- 睾酮
- 1、5 或 20 μM；每插入物 50 万个细胞，至 72 小时测原药，未测代谢物。
- 外推与稳定性
- 文献代谢能力比值、70 kg 成人、生理肝重和血流、药物游离比例用于充分搅拌肝模型；进行 500 次自助重采样。
测量指标与分析
- 原药浓度时间过程
- 4-羟基双氯芬酸时间过程
- 扩散参数
- HepaRG 及人肝细胞固有清除率
- 预测人肝清除率
- 参数不确定度
物理扩散与细胞代谢分别拟合，细胞数量采用非线性校正；按文献活性比值校正至原代人肝细胞后，再放大至人肝及全身水平。
研究设计与结果
药物集评价
- 研究设计
- 两种代谢底物实验拟合与自助重采样；所得清除率和临床药代动力学（pharmacokinetics，PK）模拟与文献资料比较。
- 测试范围
- 2 种代谢底物，各实验条件 3 次重复测量；稳定性分析 500 次重采样，未提供独立多药盲法队列。
- 参照体系
- 双氯芬酸/睾酮的文献人体清除率与双氯芬酸临床 PK 时间资料。
- 研究结果
- 双氯芬酸预测肝清除率 2.91 mL/min/kg，睾酮为 5.03–11.63 mL/min/kg；双氯芬酸人体 PK 模拟峰值/暴露量略低，半衰期较接近参照。
适用条件与研究局限
- 初次估计部分代谢参数不确定度高，自助重采样未消除所有参数差异。
- 睾酮 70% 活性校正来自咪达唑仑 CYP3A4 资料，底物特异性尚未独立验证。
- 仅双氯芬酸和睾酮 2 种代谢底物。
- HepaRG 的代谢物构成、增殖及活性可能不同于原代人肝细胞。
来源与原文
- Mechanistic in vitro–in vivo extrapolation (IVIVE) approach using a biomimetic in vitro system for the prediction of hepatic clearance.原始研究 · Computational and Structural Biotechnology Journal · 2025-05-26