胎肺 AT2 类器官 SFTPC 加工与运输评价
用可扩增 AT2 类器官检查表面活性蛋白成熟、分泌与定位，并比较内源和外源表达系统的工具药物反应。
用途与模型
- 研究用途
- 检查肺泡模型质量及蛋白运输调控靶点；在生理细胞中复核工程筛选结果。
- 模型与细胞来源
- 人胎肺远端上皮来源 AT2 类器官，非成人患者或 iPSC 模型。
- 方法版本
- 2025 年人胎肺 AT2 类器官及内源性 SFTPC 比较
- 实验形式
- 三维扩增培养，以成像、流式和转录检测评价 SFTPC 处理，并与工程 HeLa 表达系统比较。
材料与平台
- 细胞模型
- 16–22 周受孕后人胎肺来源类器官；质量和功能相关比较采用多条独立类器官线。
- 工具干预
- TAK-981 抑制 SUMO 活化；人 AT2 类器官以 500 nM 处理 24 小时。ITCH/UBE2N 降低用于蛋白运输机制比较。
- 检测
- 成熟蛋白与板层小体成像、SFTPC 表面流式、qPCR、单细胞和 bulk RNA 测序。
测量指标与分析
- 成熟 SFTPB/SFTPC 及板层小体
- 长期传代的 AT2 转录身份
- 细胞表面与细胞内 SFTPC 定位
- TAK-981 处理后的 SFTPC 转录与定位
成熟度、细胞组成、谱系转变和运输定位分别检测；工具药物在内源与外源启动子系统中的反应分别报告。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 比较类器官传代及模型来源，检查候选调控因子和 SUMO 工具抑制的反应。
- 测试范围
- 4 条类器官线用于转录稳定性和单细胞分析；单细胞 9619 个，相关功能及 TAK-981 实验主要 3 条生物独立线。
- 参照体系
- 早晚传代、其他来源 AT2 数据、未处理或相应对照及工程 HeLa 表达系统。
- 研究结果
- 类器官保留表面活性物质加工特征；ITCH 降低引起 SFTPC 异常定位，TAK-981 未改变内源 SFTPC 的对应表达和定位，但外源启动子系统有反应。
适用条件与研究局限
- 模型缺少成人 AT2 的部分免疫相关表达特征。
- 部分细胞群并非均一 AT2。
- 没有广泛药物库、临床预测或跨实验室验证。