子宫内膜癌类器官的 14 天药物生长抑制试验
按大于 100 µm 的模型数比较药物对形成和持续生长的影响。
用途与模型
- 研究用途
- 研究初代肿瘤培养的药物和内分泌治疗反应差异。
- 模型与细胞来源
- 15 份子宫内膜癌培养；多用 P0，BBI608 浓度—反应采用 P1；不同药物试验覆盖的培养数量不同。
- 方法版本
- 原研究正式发表版本
- 实验形式
- BME-2 基质、96 孔板；显微镜下计数直径超过 100 µm 的类器官。
材料与平台
- 组织处理
- 约 0.5–1 cm³ 组织剪至≤1 mm；2.5 mg/mL collagenase IV、40 µg/mL hyaluronidase、2 U/mL DNase I，在 37 °C 摇动 2 小时，100 µm 筛过滤；红细胞裂解后洗涤。
- 生长培养液
- DMEM/F12 加 2% B27、10 mM HEPES、1% GlutaMAX、1.25 mM NAC、100 µg/mL Primocin、10 mM nicotinamide、0.5 µM A83-01、3 µM SB202190、10 µM Y-27632 和 1 nM 17β-雌二醇；所试 P0 体系未另加 EGF/FGF/Noggin/Wnt。
- 接种和给药
- 每孔 5,000 个细胞、5 µL BME，倒置 37 °C 凝胶 20 分钟，再加 100 µL 药物培养液；每 2 天换液，持续 2 周，0.1% DMSO 对照。来曲唑条件不加雌二醇。
- 计数和重复
- 2 周后 Olympus IX81 计直径>100 µm 模型；每条件 6 复孔。抑制率=100−100×给药组平均模型数/对照组平均模型数；t 检验比较，BBI608 在 P1 用 4 浓度拟合 IC50。
测量指标与分析
- 每孔>100 µm 类器官数
- 生长抑制率
- BBI608 生长 IC50
按同模型未处理组进行生长计数比较；各药物覆盖的培养数量分别报告，组织免疫特征另与原肿瘤比较。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 药物在模型形成/扩增过程中持续存在，以持续长大的模型数比较。
- 测试范围
- 13 份对照计数；紫杉醇试验 14 份培养、氟维司群试验 7 份 1 级肿瘤培养、BBI608 IC50 试验 10 份培养。
- 参照体系
- 同一培养 0.1% DMSO 对照，每个条件设 6 个复孔。
- 研究结果
- 紫杉醇抑制 11/14，氟维司群抑制 4/7；BBI608 平均 IC50 0.328 µM（0.02–0.948）。
适用条件与研究局限
- 计数只纳入直径大于 100 µm 的类器官，较小结构未进入这一生长终点。
- 短期原代/早代生长条件，长期传代条件未在本研究充分验证。
- 孕激素生长检测为阴性；本研究未比较模型药敏与患者接受治疗后的疗效。
来源与原文
- The Use of Endometrial Cancer Patient–Derived Organoid Culture for Drug Sensitivity Testing Is Feasible原始研究 · International Journal of Gynecological Cancer · 2017-07-05