EGFR 突变肺癌类器官的 7 天药敏比较
比较具有不同细胞状态和 CDKN2A/B 背景的肺癌模型，对奥希替尼及 CDK4/6 抑制剂开展 7 天药敏测试。
用途与模型
- 研究用途
- 探索 EGFR 突变肺癌的耐药状态和候选 CDK4/6 药物反应。
- 模型与细胞来源
- 39 条患者来源库中的肺癌类器官；54 药筛采用 3 条 basal-shift 与 2 条非 basal-shift 模型。
- 方法版本
- 原研究正式发表版本
- 实验形式
- Matrigel 培养、96 孔板及 CellTiter-Glo 细胞活力检测。
材料与平台
- 模型培养
- 患者取材来源包括切除、活检、胸腹腔液等；Matrigel 包埋，Advanced DMEM/F12 配合 B27、EGF、FGF-2、IGF-1、Noggin、R-spondin-1、Wnt-3A 条件培养液及 A83-01 等，每 3–4 天换液。
- 药物与对照
- 96 孔板每孔 1500 个细胞，处理 7 天；奥希替尼、帕博西尼、阿贝西利与匹配浓度 DMSO 对照比较。54 种抑制剂筛选使用 3 条 basal-shift 和 2 条非 basal-shift 模型，每条模型 3 个重复。
- 检测与拟合
- CellTiter-Glo 检测相对活力，使用 Cytation5 或 GloMax 读数，Prism 计算 IC50；扩展 CDK4/6 药敏图中各模型 IC50 由 4 个技术重复获得。
测量指标与分析
- 相对细胞活力
- IC50
- 不同细胞状态和 CDKN2A/B 背景的药物反应
各模型按 DMSO 归一化；54 药筛使用 3 个重复，扩展药敏用 4 个技术重复拟合各系 IC50，分别比较细胞状态、CDKN2A/B 基因型和驱动基因背景。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 54 种药物在 3 条 basal-shift 与 2 条其他 EGFR 耐药模型中比较，并扩展 CDK4/6 药物测试。
- 测试范围
- 54 药筛 5 条模型；后续各系 4 个技术重复获得 IC50。
- 参照体系
- 非 basal-shift 模型、CDKN2A/B 野生型或缺失模型及 KRAS 背景模型。
- 研究结果
- EGFR 突变且 CDKN2A/B 缺失模型对 CDK4/6 抑制较敏感，作用仍依赖遗传背景。
适用条件与研究局限
- 模型库 39 条来自 31 名患者，建系选择可能影响各亚型比例。
- 药物作用主要表现为生长停滞。
- 文中对活力检测信号的描述有差异：方法段写作吸光度，图 2 以 ATP 相对丰度表示活力。
- 临床未验证模型药筛指导 CDK4/6 治疗获益。
来源与原文
- Basal-shift transformation leads to EGFR therapy-resistance in human lung adenocarcinoma原始研究 · Nature Communications · 2025-05-11