皮肤神经纤维瘤混合细胞类器官药物筛选
采用患者皮肤神经纤维瘤细胞的 Matrigel 小型环状培养，在培养条件优化后测量多药处理的 ATP 相对活力。
用途与模型
- 研究用途
- 良性皮肤神经纤维瘤的早期候选药物比较。
- 模型与细胞来源
- 患者来源皮肤神经纤维瘤模型，包含施万细胞、成纤维细胞和肥大细胞等成分；药筛使用 4 名患者的 5 份样本。
- 方法版本
- 2024 年原研究版本
- 实验形式
- 96 孔小型环状三维培养，每孔 5,000 个细胞；Matrigel 与 Mammocult 按 4:3 混合。
材料与平台
- 培养条件比较
- 以 Mammocult、DMEM/F12 加 10% FBS 和 StemPro-34 SFM 为基础，组合细胞因子和 forskolin 等补充条件，共比较 9 种方案。
- 给药时序
- 新鲜细胞接种 3 天、冻存恢复细胞接种 4 天后开始给药；24 小时换入含药培养液，再处理 24 小时。
- 检测和对照
- CellTiter-Glo 3D ATP 发光检测，采用 DMSO 溶剂对照和 staurosporine 阳性对照。
测量指标与分析
- ATP 相对活力
- 生长与三维网络形态
- S100、CD34 和 c-Kit 标志物对应的细胞组成
ATP 结果按溶剂对照归一化；结合生长、细胞标志物和模型分子特征选择培养条件，再比较多个患者样本共同出现的药物反应。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 培养优化与药物筛选使用不同的明确样本集合；筛选 43 种药物并关注跨样本一致反应。
- 测试范围
- 培养优化为 5 名患者 6 份样本；药筛为 4 名患者 5 份样本。
- 参照体系
- 9 种培养条件、DMSO 对照和阳性对照；原病灶与对应类器官特征比较。
- 研究结果
- StemPro 基础条件综合生长和模型特征较适合筛选；4 种候选药物在各样本中均降低模型的 ATP 活力，平均残余活力不超过 50%。
适用条件与研究局限
- 样本采用的补充培养条件不同，可能影响药物反应。
- ATP 为整个混合细胞模型信号，未分别量化每种细胞的药物敏感性。
- 神经轴突等微环境成分可能未被模型完整保留，尚无相应候选治疗的患者结局比较。
来源与原文
- A platform for rapid patient-derived cutaneous neurofibroma organoid establishment and screening原始研究 · Cell Reports Methods · 2024-05-13