ClpP 激活剂的动态灌流与生长药效比较
在同一人乳腺癌细胞系中比较浓度和暴露时长，用完整生长曲线估计药代药效关系。
用途与模型
- 研究用途
- 探索线粒体酪蛋白水解蛋白酶 P（caseinolytic protease P，ClpP）激活剂 TR-107 与 ONC201 的暴露时间及给药安排，并与既有体内资料比较。
- 模型与细胞来源
- 表达红色荧光蛋白的 MDA-MB-231 人三阴性乳腺癌细胞；Ⅰ型装置以自动阀门切换浓度，Ⅱ型装置通过输入混合形成动态曲线。
- 方法版本
- 2025 年Ⅰ型时窗、Ⅱ型动态药代与连续成像版本
- 实验形式
- 显微镜兼容微流道灌流培养，流量 500 μL/h；每 8 小时成像，观察 1 周，以细胞覆盖面积记录生长。
材料与平台
- 浓度与时长比较
- TR-107 每日总暴露统一为 480 nM·h，比较 1、2、4、8、24 小时；固定 40 nM 后另比较每日及单次不同暴露窗口。
- 测量与重复
- 静态孔板每条件 3 个技术重复，灌流每条件 4 个；生长曲线采用均值和标准差，方差分析配合 Tukey 多重比较。
- 模型输入
- Ⅰ型多组数据估计药代动力学—药效动力学（pharmacokinetic–pharmacodynamic，PK-PD）参数，以游离浓度作为模型输入；既有小鼠药代与蛋白结合资料提供体内输入，Ⅱ型动态实验进一步检查预测。
测量指标与分析
- 细胞覆盖面积随时间变化
- 第 4/7 天生长抑制浓度
- 动态暴露下相对生长
- 线粒体膜电位
- 模型与既有小鼠肿瘤曲线比较
分别比较总暴露相等、浓度相等及每日或单次处理的响应；体外与既有小鼠曲线按未处理组约 20 倍增长所需时间归一化，分别为 168 小时与 25 天。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 同一细胞系的Ⅰ型暴露比较、Ⅱ型动态曲线与模型预测检查。
- 测试范围
- MDA-MB-231 单一细胞系；灌流每条件 4 个技术重复，静态每条件 3 个。
- 参照体系
- 未处理、持续暴露、相同每日总暴露及不同每日/单次时长；既有小鼠肿瘤资料另作外部参照。
- 研究结果
- 相同 480 nM·h 下，8/24 小时比 1/2/4 小时抑制更强；40 nM 单次 48 小时与持续 1 周无显著差异，4/8 小时与未处理无显著差异。
适用条件与研究局限
- 单一肿瘤细胞系，未加入肝代谢或正常组织安全性。
- 血浆蛋白结合与小鼠 PK 输入来自既有研究；鼠曲线比较对应 MDA-MB-231 肿瘤背景。
- 168 小时与 25 天用于增长尺度归一化，不是原始观察时间相同。
来源与原文
- Dose Optimization of ClpP Agonists Using an In Vitro Microfluidic Perfusion Platform and In Silico Pharmacokinetic-Pharmacodynamic Modeling.原始研究 · The AAPS Journal · 2025-06-13