宫颈癌类器官的 PPTN 药效与 cAMP 信号评价
用人宫颈癌类器官及 HeLa、SiHa 细胞，比较 PPTN 处理后的活性、增殖、膜损伤及 cAMP/PKA/CREB 变化。
用途与模型
- 研究用途
- 评价 P2Y14R 拮抗相关候选药理作用，并把类器官活性与增殖、分化标志及信号反应对应。
- 模型与细胞来源
- 商业提供的人宫颈癌类器官；平行使用 HeLa、SiHa 人宫颈癌细胞系。
- 方法版本
- 2026 年原研究的宫颈癌细胞与类器官比较
- 实验形式
- 三维类器官活性和免疫荧光检测，配合二维细胞活性、克隆形成及蛋白检测。
材料与平台
- 宫颈癌模型
- 商业宫颈癌类器官与 HeLa、SiHa 细胞；对照和处理组来自匹配培养及传代批次。
- PPTN 与对照
- P2Y14R 拮抗剂 PPTN；以对应未处理组比较体外药理反应。
测量指标与分析
- 类器官活性与 IC50
- Ki67、CK13 荧光信号
- LDH 释放
- 细胞内 cAMP
- PKA、CREB 及其磷酸化状态
分别分析二维细胞 24 小时和类器官 72 小时的活性曲线；结合免疫荧光、ELISA 和免疫印迹比较增殖与信号变化。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- PPTN 处理与对应对照比较，使用细胞和类器官的独立指标。
- 测试范围
- HeLa、SiHa 及宫颈癌类器官；主要蛋白和免疫荧光检测各组为 3 个样本。
- 参照体系
- 各模型对应未处理对照；不同模型的活性处理时长分别为 24 小时和 72 小时。
- 研究结果
- 24 小时 IC50 为 HeLa 6.869 μM、SiHa 10.66 μM；类器官 72 小时 IC50 为 34.88 μM。类器官 Ki67 降低、CK13 无明显变化；cAMP 水平和 PKA、CREB 磷酸化水平均升高。
适用条件与研究局限
- 仅用 PPTN 药理干预，受体特异作用尚缺遗传验证。
- 结果来自体外模型；CK13 是单一分化相关标志。
- 细胞与类器官处理时长不同，IC50 不作跨模型直接效力排序。