NAMs新方法学前沿

心脏芯片的收缩、钙瞬变与电活动功能质控

在人诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cells,iPSC)来源心肌芯片中,采用明场与荧光视频分别测量收缩、钙瞬变和电活动,并比较细胞外钙与起搏条件。

用途与模型

研究用途
用于候选药物心脏效应研究前的模型功能检查,识别培养质量、钙条件及起搏跟随情况对功能参数的影响。
模型与细胞来源
人 iPSC 来源心肌微组织培养在微流控心脏芯片内,进行活细胞视频检测。
方法版本
2025 年方案的细胞外钙与起搏功能比较版本
实验形式
明场图像相关分析测量组织位移;钙和电压相关荧光视频提取强度变化,经背景漂移校正及每搏分段后计算功能参数。

材料与平台

检测方式
明场视频用于收缩位移和速度;钙敏感与膜电位相关荧光用于持续时间和频率参数。补充资料报告约 65 帧/秒的视频采集。
细胞外钙比较
图 6 在固定 1.2 Hz 起搏下比较不同细胞外钙条件的 3 类功能参数。
起搏比较
公开图 7 在 0.75–2 Hz 范围内比较起搏条件,并检查实际频率能否跟随设定频率。

测量指标与分析

  • 收缩位移
  • 收缩与舒张速度
  • 收缩持续时间
  • 钙瞬变持续时间
  • 动作电位复极达到 80% 的持续时间(action potential duration at 80% repolarization,APD80)
  • 实际跟随频率

各类成像结果分别汇总;未能跟随起搏的记录按源表标记排除,各条件采用相应实际样本数。原图以均值和标准差展示。

研究设计与结果

方法文件报告的验证结果

研究设计
在固定 1.2 Hz 起搏下比较细胞外钙条件,并分别测量收缩、钙瞬变及动作电位参数。
测试范围
图 6 报告 4 份功能重复,源表列 4 个记录编号。
参照体系
图示以最低细胞外钙条件为参照,比较其余钙浓度下的各功能参数。
研究结果
较高钙条件下收缩位移较大,钙瞬变及动作电位持续时间缩短,钙和电压相关频率接近设定起搏频率。

适用条件与研究局限

  • 电活动、钙瞬变和机械收缩分别测量,各项持续时间与位移参数反映不同功能。

方法文件报告的验证结果

研究设计
比较不同起搏频率下的功能持续时间与实际跟随频率。
测试范围
收缩、钙及电压源表在 0.75、1、2 Hz 各排除 1 份未跟随记录;各条件实际纳入 3–4 份记录。
参照体系
图示以 0.75 Hz 为起点,与其余起搏频率比较。
研究结果
起搏加快时,钙瞬变持续时间和 APD80 总体缩短;部分收缩记录未跟随设定起搏,未纳入相应汇总。

适用条件与研究局限

  • 部分微组织未跟随设定起搏,相应记录被排除,汇总样本量随条件改变。

来源与原文

  1. Human induced pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes and their use in a cardiac organ-on-a-chip to assay electrophysiology, calcium and contractility方法资料 · Nature Protocols · 2025-04-07

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