CALM1 反义寡核苷酸的人源心肌复极与选择性评价
ASO4 使 CALM1 转录本约减少一半，并维持总钙调蛋白；场电位和动作电位持续时间恢复至接近野生型。工程变异线的钙瞬变仍较长，ASO3 有明显脱靶影响。
用途与模型
- 研究用途
- 评价 CALM1 ASO 的靶标抑制、选择性、代谢活性与复极改善；用于该变异的候选物研究。
- 模型与细胞来源
- 1 位 CALM1 F142L 患者的 iPSC 来源心肌细胞，以及 WTC11 同背景 F142L 变异线、野生型参考线和 CALM1 功能缺失线。
- 方法版本
- 原文 2024-08-19 版本
- 实验形式
- 心肌细胞单层；在 1 Hz 起搏下，MEA 记录场电位，电压与钙荧光分别记录动作电位和钙瞬变。
材料与平台
- ASO1、ASO3、ASO4 与阴性对照 ASO
- 候选物分别比较；人源功能评价重点为 ASO4，5 μM。
- 人源 iPSC 心肌细胞
- 患者线与同基因背景工程变异/野生型比较，功能缺失线辅助评价靶基因降低的可行性。
- MEA 与电压、钙荧光测量
- 场电位、动作电位和钙瞬变分别记录。
测量指标与分析
- CALM1/2/3 转录本
- 总 CaM 蛋白
- RNA 测序脱靶变化
- ATP 与 NAD(P)H 相关代谢活性
- 场电位与动作电位持续时间
- 钙瞬变持续时间及衰减
候选 ASO 与阴性对照及未处理细胞比较，电生理同时采用变异与野生型。图 2 的转录检测在 24 小时暴露后的第 7 天进行；其他功能终点按各自检测条件评价。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 患者来源和工程 F142L 模型分别与野生型/阴性 ASO 比较；缺失线作为功能参照。
- 测试范围
- 患者来源仅 1 位；图中样本数对应独立培养孔。
- 参照体系
- 患者来源和工程 F142L 模型分别与野生型/阴性 ASO 比较；缺失线作为功能参照。
- 研究结果
- ASO4 使 CALM1 转录本约减少一半，并维持总钙调蛋白；场电位和动作电位持续时间恢复至接近野生型。工程变异线的钙瞬变仍较长，ASO3 有明显脱靶影响。
适用条件与研究局限
- 结果限于 CALM1 F142L 的人源体外模型，尚未验证患者疗效或临床安全性；工程变异线的钙瞬变未完全恢复。
来源与原文
- Antisense Oligonucleotide Therapy for Calmodulinopathy原始研究 · Circulation · 2024-08-19