BRCA1 输卵管类器官衍生细胞的 PARP 抑制剂比较
以患者 iPSC 来源输卵管类器官为起点，分别比较解离细胞及移植病灶衍生细胞的 PARP 抑制剂反应。
用途与模型
- 研究用途
- 研究患者遗传背景和材料来源如何影响 PARP 抑制后的细胞毒性、活力及 DNA 损伤。
- 模型与细胞来源
- 3 位 BRCA1 致病变异患者与 3 位对照的 iPSC 衍生输卵管上皮类器官；具体药物任务使用其不同来源的单层细胞。
- 方法版本
- 2021 年 Cell Reports：直接类器官解离细胞与移植病灶衍生细胞分开比较
- 实验形式
- 移植病灶 79i-BRCA 衍生细胞与 8 个月类器官直接解离细胞，分别在单层培养中分析。
材料与平台
- PARP 抑制剂
- 芦卡帕利、尼拉帕利和奥拉帕利分别与相应溶剂参照比较，记录所测细胞材料身份。
- 不同来源的参照
- 8 个月类器官实验采用指定对照 87i-CTR 与 08i/70i/79i-BRCA；移植病灶衍生细胞主要为 79i-BRCA。
测量指标与分析
- 乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）释放所示细胞毒性
- PrestoBlue 细胞活力
- DNA 损伤及细胞死亡相关标志
- 增殖相关标志
按细胞来源、药物和检测指标分别比较；LDH 释放反映细胞损伤，PrestoBlue 反映细胞活力，也会受到增殖变化影响。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 分别比较不同 PARP 抑制剂与溶剂参照，并在直接解离细胞任务比较患者来源细胞系。
- 测试范围
- 原模型来自 3 位 BRCA1 变异患者和 3 位对照；图 6 药物检测标注 3 次独立生物实验。
- 参照体系
- 各任务相应的 DMSO 处理；直接解离细胞另含 87i-CTR 及 3 个指定 BRCA1 变异系。
- 研究结果
- 芦卡帕利在所测变异系中引起明显细胞毒性；尼拉帕利/奥拉帕利作用随来源和终点不同，部分细胞系无明显活力下降。
适用条件与研究局限
- 药物结果限于单层衍生细胞。
- 移植病灶与 8 个月类器官解离细胞属于不同材料来源。
- LDH、PrestoBlue 和蛋白标志测量不同终点。
- 小样本实验未建立前瞻性患者疗效预测性能。
来源与原文
- Human iPSC-derived fallopian tube organoids with BRCA1 mutation recapitulate early-stage carcinogenesis原始研究 · Cell Reports · 2021-12-28