NAMs新方法学前沿

血脑屏障芯片与 Transwell 的代谢损伤—低温恢复比较

比较代谢性缺血样损伤后的连接形态及低温恢复相关分子变化。

用途与模型

研究用途
急性 BBB 损伤与屏障恢复条件研究,后续治疗测试准备。
模型与细胞来源
原代人脑微血管内皮、星形胶质与周细胞;未含微胶质细胞。
方法版本
2026 年原代三细胞、Emulate/Transwell 并行版本
实验形式
2.5 μM antimycin A/无葡萄糖培养液 1 小时,换液后 37°C 或 33°C 恢复至 48 小时。

材料与平台

培养平台
Emulate Chip-S1 双通道与 0.4 μm Transwell;胶原、层粘连蛋白等支持,芯片重力流动。
检测
芯片明场/ZO-1;Transwell 蛋白、qPCR/电阻;基础状态 FITC-dextran 通透。

测量指标与分析

  • ZO-1 连接连续性
  • 内皮覆盖
  • 连接基因
  • HIF-1α
  • CIRBP/RBM3

定量样本按组 ANOVA/Tukey;芯片终点成像和 Transwell 分子资料分别解释。

研究设计与结果

实验条件比较

研究设计
未损伤、损伤、常温换液恢复及低温换液恢复条件比较。
测试范围
Fig2 每组 3 个独立芯片;定量项目 3–4 独立样本,供者数量未明确。
参照体系
未处理组、损伤组及 37°C 恢复组。
研究结果
33°C 恢复组连接形态及多项表达指标更完整;单独低温作用未显著。

适用条件与研究局限

  • 不是血流闭塞模型,氧水平/流量/剪切未直接量化。
  • 芯片没有稳定 TEER,损伤恢复期示踪物通透未报告。
  • 未测候选药物集或临床结局,限 48 小时观察。
  • 无微胶质与充分炎症系统;未做完整代谢功能验证。

来源与原文

  1. A human 3D BBB chip model of acute stroke simulating a reversible penumbra原始研究 · PLOS One · 2026-07-14

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