NAMs新方法学前沿

血脑屏障芯片的普拉克索转运与神经细胞分泌检测

在动态血脑屏障模型中测量脑侧药物浓度及去甲肾上腺素分泌,比较静态模型的转运时程与损伤后药物反应。

用途与模型

研究用途
观察跨屏障药物暴露、神经细胞分泌及屏障恢复之间的时间关系。
模型与细胞来源
血管侧为 hCMEC/D3 人脑微血管内皮细胞,脑侧为未分化 SH-SY5Y 人神经母细胞瘤细胞;两侧由 0.45 µm 多孔膜分隔。
方法版本
2026 年 hCMEC/D3–SH-SY5Y 双层芯片与静态 Transwell 比较版本
实验形式
微流控双层培养及静态 Transwell 参照;损伤后输入普拉克索,结合质谱与电化学浓度检测。

材料与平台

屏障培养与检查
动态培养流量 120 µL/min;跨内皮电阻、紧密连接、葡聚糖通透性及外排转运功能分别检查。
药物暴露
损伤模型处理后在血管侧输入 750 µM 普拉克索,按时间测量脑侧实际浓度。
分析与功能
液相色谱—质谱测量普拉克索及去甲肾上腺素;另测 CCK-8 代谢活力、凋亡相关和屏障指标。
传感器性能
电化学传感器 5–500 µM 线性范围,更新表面后检验重复使用的浓度测量性能。

测量指标与分析

  • 脑侧普拉克索浓度时程
  • 表观通透性
  • 去甲肾上腺素分泌
  • 细胞代谢活力
  • 屏障电阻与通透性

动态芯片与静态 Transwell 分别估计转运速度,并比较达到模型预设 200 µM 浓度的加药后时间;去甲肾上腺素与细胞活力独立分析。

研究设计与结果

药物集评价

研究设计
动态/静态屏障及质谱/传感器浓度检测比较,再观察损伤有无药物治疗的功能时程。
测试范围
原文统计说明至少 3 次独立实验;各图的重复数按具体指标分别给出。
参照体系
静态 Transwell、未治疗损伤组及未损伤参照。
研究结果
脑侧达到 200 µM 约需加药后 13 小时,静态约 8 小时;芯片 Papp 约 7.28×10⁻⁷ cm/s,静态约 1.22×10⁻⁶ cm/s。治疗组去甲肾上腺素分泌逐步恢复。

适用条件与研究局限

  • SH-SY5Y 为未分化肿瘤细胞系,未使用成熟人神经元。
  • 模型未加入周细胞及星形胶质细胞。
  • 只有一个药物;200 µM 为实验预设目标,无配对人体药代验证。

来源与原文

  1. Micro pharmacokinetics-pharmacodynamics monitoring of anti-Parkinson’s disease drugs using a microphysiological BBB-brain organ-on-a-chip原始研究 · Microsystems & Nanoengineering · 2026-02-03

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