肺泡细胞系呼吸芯片的屏障与刺激响应检查
两类基线培养跟踪 25 天，约第 14–16 天达到作者设定的屏障阈值；拉伸使部分标志升高而 ZO-1/CAV1/HHIP 不显著；两类挑战使电阻下降，LPS 后 IL8 增加。
用途与模型
- 研究用途
- 检查可持续人源肺泡模型进入肺毒性和药物评价前的身份、屏障及损伤响应。
- 模型与细胞来源
- AXiAEC 人原代来源永生化肺泡细胞系，部分评价与人肺微血管内皮细胞及外周血单个核细胞共培养。
- 方法版本
- 2022-06-17 原研究相关主文
- 实验形式
- 超薄弹性膜呼吸肺芯片，浸没/气液界面及静态/呼吸样机械条件分别比较。
材料与平台
- 模型身份
- AXiAEC 为永生化细胞系，起始 AT1 样特征为主，芯片培养检查 AT1/AT2 相关标志。
- 屏障测量
- TER 与 ZO-1 边界染色；培养跟踪至 25 天，作者采用 1000 Ω·cm²模型阈值。
- 有界挑战
- TGFβ1 5 或 10 ng/mL 促纤维化挑战，以及 LPS 0.1 μg/mL 非感染性炎症刺激；后者用于 AXiAEC/肺微血管内皮与 PBMC 共培养。分别比较 72 小时电阻和相应标志。
测量指标与分析
- TER 时间变化
- 上皮/AT1/AT2 标志
- 机械条件相关表达
- CDH1/ACTA2/COL1A1
- 炎症后 IL-8
区分模型身份、基线屏障、机械相关表达与挑战后损伤，保留不显著的标志变化。
研究设计与结果
方法可行性研究
- 研究设计
- SUB 与 ALI；浸没条件下静态与呼吸样拉伸；TGFβ1 或 LPS 与相应未处理参照。
- 测试范围
- 25 天 SUB 三次实验 10 孔、ALI 三次实验 9 孔；Fig4E 基因表达 N=1、n=3，基因分析样本合并 3–4 个孔。N 为实验，n 按对应检测定义，不作供者数量。
- 参照体系
- SUB 与 ALI；浸没条件下静态与呼吸样拉伸；TGFβ1 或 LPS 与相应未处理参照。
- 研究结果
- 两类基线培养跟踪 25 天，约第 14–16 天达到作者设定的屏障阈值；拉伸使部分标志升高而 ZO-1/CAV1/HHIP 不显著；两类挑战使电阻下降，LPS 后 IL8 增加。
适用条件与研究局限
- 本次为模型质量和非感染损伤挑战，未测独立治疗药物性能。
- 原资料 ALI 起始 D11 与 D5 的记载不一致；25 天培养跟踪结果按对应条件解释。
- 炎症挑战检测屏障与 IL-8，促纤维化挑战检测电阻及相关标志，两者对应不同用途。
来源与原文
- A New Immortalized Human Alveolar Epithelial Cell Model to Study Lung Injury and Toxicity on a Breathing Lung-On-Chip System原始研究 · Frontiers in Toxicology · 2022-06-17