ALS iPSC 运动神经元蛋白稳态和热休克反应评价
在患者 iPSC 衍生运动神经元中，分别评价蛋白斑点、可溶与不溶性蛋白及应激反应。
用途与模型
- 研究用途
- 为蛋白稳态靶点研究提供人源疾病表型和条件比较；后续药物反应需单独验证。
- 模型与细胞来源
- SOD1 N139K、C9orf72 及 TDP-43 M337V 相关人 iPSC 衍生运动神经元和对照培养物。
- 方法版本
- 2018 年 SOD1／C9orf72／TDP-43 多背景比较
- 实验形式
- 以运动神经元为主、星形胶质细胞标志较少的培养物；在 3–4 周观察基础表型和短时热刺激响应。
材料与平台
- 细胞来源
- SOD1 和 TDP-43 各 1 条细胞线，C9orf72 与对照各 3 条线。
- 检测组合
- 免疫染色、蛋白印迹、滤膜捕获及 qPCR；不将可见斑点与不溶性蛋白等同。
测量指标与分析
- 运动神经元数量
- SOD1/TDP-43/OPTN 斑点及可溶、不溶信号
- HspB1/HspB8/BAG3 及 HSF1 磷酸化
- G3BP 相关应激颗粒指标
按遗传背景分别比较基础与热刺激条件；滤膜及蛋白印迹按各自对照归一化，显著变化和未达显著的趋势分别报告。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 比较 3 类 ALS 背景与对照，再检查短时热刺激响应。
- 测试范围
- 共 8 条 iPSC 线；主要图为 3 个或更多重复，独立实验和细胞线数量分别登记。
- 参照体系
- 对照运动神经元、未分化 iPSC 以及各背景未受热刺激条件。
- 研究结果
- 3–4 周细胞数量未显著减少；不溶性蛋白多有未达显著的增加趋势，HSR 基础反应不完整，热刺激诱导因遗传背景而异。
适用条件与研究局限
- SOD1 和 TDP-43 各仅 1 条细胞线。
- 未开展治疗药物、临床预测或跨实验室验证。
- 不溶性蛋白的多项组间结果未达显著。
来源与原文
- Modeling Protein Aggregation and the Heat Shock Response in ALS iPSC-Derived Motor Neurons原始研究 · Frontiers in Neuroscience · 2018-02-20