分隔式人源神经肌肉模型的远端轴突结构与 pTDP-43 定量
为人源神经肌肉模型中的候选干预提供区域明确的轴突结构和蛋白相关表型终点。
用途与模型
- 研究用途
- 为人源神经肌肉模型中的候选干预提供区域明确的轴突结构和蛋白相关表型终点。
- 模型与细胞来源
- 微流控分隔的人诱导多能干细胞（induced pluripotent stem cells，iPSCs）来源运动神经元—肌管共培养，在远端区室对神经丝重链（neurofilament heavy chain，NFH）和磷酸化 TDP-43（pTDP-43）图像进行分析。
- 方法版本
- 2026 年方法论文；2026-09-05
- 实验形式
- 分别对完整/退变 NFH 结构进行识别，并将 pTDP-43 统计限制在完整 NFH 阳性轴突内；结合阈值记录和盲法分析。
材料与平台
- 模型与标志
- 运动神经元—肌管共培养；NFH 轴突标志与 pTDP-43 信号。
- 分析工具
- Fiji/ImageJ 预处理及 CellProfiler 对象识别；原文提供相关分析资源。
测量指标与分析
- 完整与碎裂 NFH 阳性轴突结构
- 完整轴突内 pTDP-43 斑点面积/NFH 面积
- pTDP-43 斑点数/NFH 面积
流程将轴突结构退变和完整轴突内 pTDP-43 分开量化，减少肌管等背景干扰。验证依据来自 2025 年原研究，2026 年方法文增加斑点密度等分析输出。
研究设计与结果
方法文件报告的验证结果
- 研究设计
- 分别对完整/退变 NFH 结构进行识别，并将 pTDP-43 统计限制在完整 NFH 阳性轴突内；结合阈值记录和盲法分析。
- 测试范围
- 代表性图 4 定量为 28 和 18 个成像视野，来自 3 次独立培养的共培养系统；不是独立患者数。
- 参照体系
- ALS 相关 TDP-43 变异与同基因对照共培养的代表性展示；分析在预先定义远端区域内进行。
- 研究结果
- 流程将轴突结构退变和完整轴突内 pTDP-43 分开量化，减少肌管等背景干扰。验证依据来自 2025 年原研究，2026 年方法文增加斑点密度等分析输出。
适用条件与研究局限
- 仅完整 NFH 区域的蛋白统计不能代表整个区室总聚集量。
- 阈值、分割和成像质量需按新资料重新确认，流程参数不等于通用固定数值。
- 分析迁移到其他轴突类型或蛋白时，需要重新确认识别与分割质量。
- 代表性定量由 2025 年原研究调整展示，2026 年方法文重点说明分析流程。