用有害结局路径组织肾毒性检测
铂类抗肿瘤药物的肾毒性程度和作用过程各有特点。乌得勒支大学（Utrecht University）团队在 NAM journal 报道一种体外比较平台，利用有害结局路径（adverse outcome pathway，AOP）组织检测项目，观察顺铂、卡铂和奥沙利铂引起的线粒体、氧化应激和细胞损伤变化。
AOP 用相互关联的生物学事件描述从初始作用到有害结局的过程。研究参考铂类药物相关路径中的线粒体功能受损、活性氧增加和细胞死亡等事件，为每个能够在细胞中观察的环节配置检测，比较药物在各环节的反应。
模型使用条件永生化的人近端肾小管上皮细胞 ciPTEC。团队在静态二维培养中设置不同浓度和 24、48、72 小时处理，先根据各药物的活力变化确定测试范围，再开展机制检测。
多项指标观察细胞损伤过程
PrestoBlue 通过染料还原反映细胞代谢活力；乳酸脱氢酶（LDH）释放用于观察细胞膜损伤。
JC-10 荧光用于观察线粒体膜电位变化，CM-H2DCFDA 探针用于检测细胞内活性氧。研究分别设置线粒体去极化剂 CCCP 和过氧化氢作为相应阳性参照，以检查检测对预期变化的响应。
团队还测量 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAG）活性。NAG 是近端肾小管损伤的相关标志。所有结果结合剂量和时间分析，每项至少包含 3 次独立实验，每次设置 3 个技术重复。
顺铂在较低浓度下即引起损伤
顺铂的半数抑制浓度随处理时间由 24 小时的 26.3 μM，降到 48 小时的 11.9 μM 和 72 小时的 10.5 μM。奥沙利铂对应为 113、44.9 和 45.5 μM，卡铂为 529、139 和 97 μM。延长暴露时间后，三种药物在相应浓度范围内都呈现更明显的活力变化。
LDH 结果中，顺铂在较低浓度即可出现细胞膜损伤信号；卡铂的变化更多集中在较高浓度和较长处理。奥沙利铂的损伤表现介于两者之间，不同时间点的增加幅度也有差别。
机制检测进一步呈现了差异。顺铂在较低浓度下就引起线粒体膜电位变化，部分变化出现时细胞活力尚未明显下降。卡铂需要更高浓度或更长时间，奥沙利铂则呈现相对有限、随时间变化的反应。
活性氧与 NAG 活性变化因药物而异
顺铂在 20 μM 条件下产生较强活性氧信号，持续到 24–48 小时。卡铂的活性氧增加较小，未形成同样显著的响应；奥沙利铂在较高浓度出现过较短暂的增加。研究将这些结果与各自的线粒体及活力变化对应。
顺铂处理后的 NAG 活性随浓度和时间增加而升高；卡铂的变化需要更高浓度和更长暴露，奥沙利铂的增加则较早出现、随后趋于平缓。作者将 NAG 作为肾小管细胞损伤的补充指标，并讨论后续加入其他损伤标志。
在 3 种药物的浓度比较中，线粒体膜电位变化通常出现在比 LDH 释放和细胞活力下降更低的浓度下。
平台仍需补充转运功能与长期暴露检测
当前平台直接测量的是细胞层面的部分关键事件。铂类药物与 DNA 结合、DNA 损伤以及最终肾功能衰竭等环节没有在本实验中逐项测量；研究也未建立各事件之间的定量因果关系模型。
作者提出，后续应扩大药物类别，增加慢性和重复暴露设计，检查肾小管转运特征，并结合动态培养或器官芯片。作者还建议结合药代动力学模型和体内—体外外推，分析细胞实验浓度与人体暴露之间的关系。
肾小管的功能检测也是后续工作的重点。现有指标以应激和损伤为主，未直接分析转运和重吸收；作者建议加入 OCT2、OAT1/3 等转运蛋白活动，并通过其他细胞来源或多细胞模型补充单层培养中的组织相互作用。
对细胞死亡过程，作者建议增加半胱天冬酶活性检测和相关抑制剂，区分不同死亡机制；并进一步研究自噬、炎症及抗氧化转录响应。
作者将这组检测定位为铂类药物的早期机制筛选，并提出用更多药物类别及模型检验其适用性。