人空肠来源单层的来那度胺双向通透与外排评价
用人空肠来源上皮单层与 gMDCK 比较来那度胺通透，结合转运抑制、细胞内累积及独立大鼠药代结果解释模型差异。
用途与模型
- 研究用途
- 研究传统单层低通透与来那度胺体内较充分暴露之间的差异。
- 模型与细胞来源
- 商品化 HISC-JEJ/D5 人空肠来源上皮细胞在 Transwell 中形成单层；gMDCK 为 P-糖蛋白敲除的犬肾上皮细胞对照，另有 P-糖蛋白和乳腺癌耐药蛋白过表达细胞。
- 方法版本
- 2025 年 RepliGut 与 gMDCK 单层比较版本
- 实验形式
- 96 孔 Transwell 人来源单层培养约 10 天；来那度胺 1–500 μM 双向给药 3 小时，按 1/2/3 小时采样。
材料与平台
- 模型与检测
- RepliGut HISC-JEJ/D5 单层、gMDCK；0.143 cm² 膜面积，顶端 150 μL、基底端 250 μL；液相色谱–串联质谱。
- 药物与参照
- 来那度胺 1–500 μM；纳多洛尔、拉贝洛尔、美托洛尔、安普那韦及荧光素黄参照。
- 转运抑制
- elacridar 5 μM 与 Ko143 1 μM 联合用于外排比较；另测相关转运体表达。
测量指标与分析
- 顶端到基底端表观通透率
- 基底端到顶端表观通透率
- 外排比
- 方向相关细胞内药物累积
- 跨上皮电阻
比较双向通透和细胞内累积，再用外排抑制与过表达细胞评价转运途径；大鼠药代独立作为体内参照。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- RepliGut 与 gMDCK 同时开展来那度胺双向通透，并比较外排抑制前后及参考药物表现。
- 测试范围
- 图 3 的人来源单层为 3 个技术重复；gMDCK 通透为 3 个生物学重复，细胞内累积为 3 个技术重复。表 3 的外排抑制结果平均来自至少 2 个技术重复；独立大鼠药代每剂量 3 只。
- 参照体系
- RepliGut 与 gMDCK；双向给药；有无 elacridar/Ko143；外排转运体过表达细胞。
- 研究结果
- 吸收方向来那度胺通透约为 0.6 与 0.2×10−6 cm/s。RepliGut 外排比从 4.60 降至 1.53；顶端给药的细胞内累积无显著差异。参考药的模型差异各不相同。
适用条件与研究局限
- RepliGut 电阻约 1600 Ω·cm²，虽低于 gMDCK，仍高于引述的人体内小肠值。
- 摄取转运体尚未确定；本研究未并列完成 Caco-2 或人工膜通透测试。
- 体内药代参照来自本研究大鼠试验，人体吸收数据另引自既有研究。
来源与原文
- Comparing the Altis RepliGut Organoid System to MDCK Monolayers in Predicting the Oral Absorption of Lenalidomide原始研究 · Pharmaceutics · 2025-08-30