儿童供者肝细胞球状体的 CBD–丙戊酸组合响应测量
在儿童供者肝细胞球状体中，平行测量大麻二酚（CBD）、丙戊酸单药与组合的三磷酸腺苷（ATP）、尿素及药物代谢物，保留供者与时间差异。
用途与模型
- 研究用途
- 检查重复给药下的组合肝细胞损伤与代谢变化，识别不同供者及功能指标的响应差别。
- 模型与细胞来源
- 2 位男性儿童供者原代肝细胞，年龄 10 岁和 6 岁；384 孔低吸附板每孔约 1,500 个细胞形成球状体。
- 方法版本
- 2025 年 2 位儿童供者、24 小时/8 天/15 天暴露版本
- 实验形式
- 培养第 6 天开始给药，每 48–72 小时更换约 60% 培养液并补药；在给药后 24 小时、8 天和 15 天测量，总培养至 21 天。
材料与平台
- 药物
- CBD 2–200 μM；组合中丙戊酸 0.5、1、10 mM；相应单药及溶剂对照。
- 功能指标
- CellTiter-Glo 细胞内 ATP；培养液尿素；CBD 与丙戊酸相关代谢物靶向质谱。
- 探索代谢组
- 仅 10 岁供者，每条件 6 个球状体加培养液合为 1 个样品、3 次技术进样；主成分/判别和通路分析用于提出代谢线索。
测量指标与分析
- 相同时点对照归一化的细胞内 ATP
- 培养液尿素
- CBD 羟基/羧基/葡萄糖醛酸结合产物
- 丙戊酸葡萄糖醛酸结合产物
- 探索代谢特征变化
分别按供者、浓度和暴露时长比较单药与组合；结合细胞状态解释代谢产物变化，尿素与 ATP 分开评价。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 2 位供者球状体平行比较不同 CBD 浓度、丙戊酸及组合，按 3 个暴露时点测量。
- 测试范围
- 2 位儿童肝细胞供者；组合 ATP 为供者内每条件 6 孔；尿素为 10 岁供者 6 个重复、6 岁供者 3 个重复；探索代谢组为每条件 1 个合样、3 次技术进样。
- 参照体系
- 同供者同时间溶剂、CBD 单用、丙戊酸单用与合用。
- 研究结果
- 较高 CBD 浓度降低 ATP，组合使部分条件下降更明显；较低浓度和尿素结果随供者不同。作者未证实超出加和预期的协同毒性。药物代谢物与探索通路也随处理及时间改变。
适用条件与研究局限
- 丙戊酸单药在方法段的单位为 μM，与摘要及模型示意中的 mM 不一致；组合试验在相应图中使用 0.5、1 和 10 mM。
- 供者仅 2 位，探索代谢组仅 1 位，每条件仅 1 个合样，质谱重复为技术进样。
- 不同指标并不总是呈现相同组合增强，需结合供者和时长解释。
- 培养蛋白结合与细胞内实际浓度未测定，代谢通路变化尚未建立损伤因果。
来源与原文
- Evaluating cannabidiol-induced liver injury with and without valproate using a three-dimensional human hepatocyte spheroid model原始研究 · Toxicology in vitro : an international journal published in association with BIBRA · 2025-08-05