胰腺癌球状体与自体类器官的 EpCAM CAR-T 比较
以细胞系单一/混合球状体及 1 例胰腺癌转移材料 PDO 比较 CD28、4-1BB 两种 EpCAM CAR-T 的杀伤和效应分子。
用途与模型
- 研究用途
- 研究靶抗原背景、三维组成和自体患者材料对免疫细胞作用的影响。
- 模型与细胞来源
- BxPC-3 球状体或 BxPC-3 与 EpCAM 阴性 hTERT–HPNE 5:1 混合；另 1 名患者胸腔积液转移材料建立的患者来源类器官（PDO）与自体 T 细胞。全人源 EpCAM scFv 的 CD28/4-1BB CAR。
- 方法版本
- 2025 年胰腺癌细胞系球状体 72 小时与 1 例自体 PDO 5 天 EpCAM CAR-T 研究
- 实验形式
- 球状体每孔 3000 细胞，低吸附培养 1–2 天形成；CAR-T 效靶比 4:1、2:1、1:1，连续 72 小时成像。自体 PDO 在 96 孔板中共培养 5 天，效靶比 10:1。
材料与平台
- 模型
- GFP 标记癌细胞和 RFP 标记阴性胰管细胞；1 例患者的 PDO 和同源效应 T 细胞。
- 干预/参照
- CD28 或 4-1BB 共刺激 EpCAM CAR-T，未转导 T 细胞和靶细胞单独组。
- 检测
- 每 4 小时 GFP/RFP 成像至 72 小时；PDO 第 5 天 LDH、IFN-γ 与颗粒酶 B。
测量指标与分析
- 球状体阳性癌细胞荧光变化与时间
- 混合模型阴性细胞信号保留
- 不同效靶比和 CAR 结构的杀伤差别
- 1 例患者 PDO 形态、共培养 LDH 和效应分子
球状体荧光先按时间 0 归一化，再相对靶细胞单独组计算细胞毒性；患者 PDO 与普通 T 组比较共培养信号。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 比较单一/混合球状体、CAR 结构和效靶比。
- 测试范围
- 球状体图来自 1 个 T 细胞供者，每条件 3 复孔；PDO 另为 1 例患者、每条件 3 复孔。
- 参照体系
- 未转导 T、靶细胞单独、EpCAM 阴性胰管细胞以及两种球状体。
- 研究结果
- 4:1 时单一/混合模型约 48/72 小时清除；患者 CAR 共培养的 LDH、IFN-γ、颗粒酶 B 增加。
适用条件与研究局限
- PDO 范围仅 1 例患者，未比较患者 CAR-T 临床经过。
- LDH 反映共培养整体膜损伤，未分型量化各类细胞死亡。
- 安全性细胞参照为 EpCAM 阴性胰管细胞，正常 EpCAM 阳性组织的风险仍待评价。
来源与原文
- Preclinical evaluation of CAR-T cell immunotherapy with a fully human EpCAM-specific scFv against pancreatic cancer原始研究 · Cancer Immunology, Immunotherapy · 2025-12-19