NAMs新方法学前沿

皮层类器官分阶段质量评分

先以非侵入形态和生长指标筛选,再结合细胞组成、组织结构与损伤标志评价类器官质量。

用途与模型

研究用途
药物模型准备阶段的批次选择与质量控制;具体药物效应需另行检测。
模型与细胞来源
健康 BJ hiPSC 来源的背侧前脑定向皮层类器官,主要质量评价在约 60 天开展。
方法版本
2025 年 60 天皮层类器官质量框架版本
实验形式
初筛使用明场形态和大小变化;终评加入免疫染色、组织结构及细胞损伤指标。

材料与平台

皮层类器官与明场成像
使用论文所列定向分化培养版本,连续记录同批模型的形态和生长。
免疫染色与共聚焦图像
SOX2、TUBB3、GFAP 等评价细胞组成和结构;γH2AX 用于 DNA 损伤表征。
分层评分表
5 类质量标准下的指标采用 0–5 级评分,按分阶段规则排除低质量模型。

测量指标与分析

  • 整体形态
  • 大小与生长变化
  • 细胞组成
  • 组织结构
  • 细胞损伤标志

按原框架的分层规则依次筛选,初筛和终评使用各自阈值;缺少某种结构的批次按作者注明的适用范围处理。

研究设计与结果

方法可行性研究

研究设计
同批初筛,并以过氧化氢扰动后恢复培养的类器官检验终评分层。
测试范围
初筛一批 58 个类器官;扰动试验 6 组、每组 4 个类器官。框架开发期间的 30 余批/1,200 余个模型属于累计经验。
参照体系
初筛前后模型、无扰动与不同扰动强度条件。
研究结果
初筛排除 10/58 个模型;终评区分了不同损伤程度,并定位导致排除的质量指标。

适用条件与研究局限

  • 累计培养数量与本次扰动检验的样本数分开。
  • 7 天恢复期未重新纳入生长评分;相应批次缺少神经上皮花环结构时,该项未评分。
  • 药物预测性能及跨实验室阈值验证需要独立研究。

来源与原文

  1. Towards a quality control framework for cerebral cortical organoids原始研究 · Scientific Reports · 2025-08-11

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