皮层类器官分阶段质量评分
先以非侵入形态和生长指标筛选,再结合细胞组成、组织结构与损伤标志评价类器官质量。
用途与模型
- 研究用途
- 药物模型准备阶段的批次选择与质量控制;具体药物效应需另行检测。
- 模型与细胞来源
- 健康 BJ hiPSC 来源的背侧前脑定向皮层类器官,主要质量评价在约 60 天开展。
- 方法版本
- 2025 年 60 天皮层类器官质量框架版本
- 实验形式
- 初筛使用明场形态和大小变化;终评加入免疫染色、组织结构及细胞损伤指标。
材料与平台
- 皮层类器官与明场成像
- 使用论文所列定向分化培养版本,连续记录同批模型的形态和生长。
- 免疫染色与共聚焦图像
- SOX2、TUBB3、GFAP 等评价细胞组成和结构;γH2AX 用于 DNA 损伤表征。
- 分层评分表
- 5 类质量标准下的指标采用 0–5 级评分,按分阶段规则排除低质量模型。
测量指标与分析
- 整体形态
- 大小与生长变化
- 细胞组成
- 组织结构
- 细胞损伤标志
按原框架的分层规则依次筛选,初筛和终评使用各自阈值;缺少某种结构的批次按作者注明的适用范围处理。
研究设计与结果
方法可行性研究
- 研究设计
- 同批初筛,并以过氧化氢扰动后恢复培养的类器官检验终评分层。
- 测试范围
- 初筛一批 58 个类器官;扰动试验 6 组、每组 4 个类器官。框架开发期间的 30 余批/1,200 余个模型属于累计经验。
- 参照体系
- 初筛前后模型、无扰动与不同扰动强度条件。
- 研究结果
- 初筛排除 10/58 个模型;终评区分了不同损伤程度,并定位导致排除的质量指标。
适用条件与研究局限
- 累计培养数量与本次扰动检验的样本数分开。
- 7 天恢复期未重新纳入生长评分;相应批次缺少神经上皮花环结构时,该项未评分。
- 药物预测性能及跨实验室阈值验证需要独立研究。
来源与原文
- Towards a quality control framework for cerebral cortical organoids原始研究 · Scientific Reports · 2025-08-11