结肠癌类器官 xCT 表型与铁死亡相关药敏比较
在 5 个结肠癌及 2 个正常结肠类器官中测表面蛋白和代谢信号，在 4 个肿瘤模型中评价 Erastin、氟尿嘧啶及铁螯合救援。
用途与模型
- 研究用途
- 研究转运和铁稳态表型与体外药物反应的关联。
- 模型与细胞来源
- 结肠原发或转移灶患者来源类器官（PDO）及正常类器官；基底膜提取物（BME）支持，靶向测序用于身份检查。药筛 T86/T162/T149/T1719，表型另含 T151。
- 方法版本
- 2025 年 5 个肿瘤及 2 个正常结肠类器官表型、4 个肿瘤模型 72 小时药敏比较
- 实验形式
- 96 孔每孔 5 µL BME 约 2000 细胞，形成 3 天后处理 72 小时，CellTiter-Glo 3D 检测。药筛常用传代 8–15，解冻后至少传 1 代；流式表型使用消化细胞。
材料与平台
- 表型
- 胱氨酸/谷氨酸转运系统轻链 xCT、转铁蛋白受体（TFRC）、CD44 表面抗体；胱氨酸摄取探针及 Phen Green SK 染色，后者以荧光淬灭反映游离铁水平，均作活细胞流式分析。
- 药物
- 氟尿嘧啶（5-FU）10 µM、Erastin 10 µM 单药/联用，去铁胺（DFO）100 µM 救援条件。
- 检测
- 72 小时三磷酸腺苷（ATP）发光及活性下降，与基线表面平均荧光强度（MFI）作关联。
测量指标与分析
- 5 个肿瘤和 2 个正常模型的表型
- 4 个肿瘤模型用药后的活性下降
- 部分条件 DFO 救援
- 表面蛋白与药敏的相关系数
比较肿瘤/正常表型及无药/处理活性；简单线性回归联系基线蛋白 MFI 与活性下降百分比。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 比较表型、药物及铁螯合条件。
- 测试范围
- 表型为 5 个肿瘤和 2 个正常 PDO，药敏为 4 个肿瘤 PDO。
- 参照体系
- 正常、未处理、单药/联用、有/无 DFO 条件。
- 研究结果
- 表面 xCT 组间未显著；T149/T1719 下降较多，部分 DFO 救援；xCT 与 Erastin/5FU 活性下降 r 约 0.95/0.97。
适用条件与研究局限
- 小规模表面蛋白相关，未作 PDO xCT 特异性遗传因果检验。
- 公共患者 RNA 与化疗反应相关未显著。
- 正常组织转录参照取自肿瘤邻近区域，可能受肿瘤相关变化影响。
来源与原文
- Patient‐specific pharmacogenomics demonstrates xCT as predictive therapeutic target in colon cancer with possible implications in tumor connectivity原始研究 · Molecular Oncology · 2025-09-24