自体 iPSC 胰岛细胞—免疫细胞的应激与反应检测
比较应激后的 β/α 细胞与自体免疫细胞的相互作用，测量 T 细胞激活、细胞因子及胰岛细胞存活。
用途与模型
- 研究用途
- 1 型糖尿病自身免疫机制与 HLA 相关干预的体外研究。
- 模型与细胞来源
- 3 位 1 型糖尿病与 1 位非糖尿病供者的 iPSC 胰岛细胞及自体 PBMC；初始为混合内分泌细胞群，另作 β/α 富集。
- 方法版本
- 2020 年内质网应激与自体 PBMC 版本
- 实验形式
- 96 孔内分泌细胞与 PBMC 共培养 48 小时；应激/未应激、细胞类型和接触条件分别比较。
材料与平台
- 人源胰岛细胞与 PBMC
- 同供者 iPSC 分化 β/α 富集细胞；初始混合细胞中目标类型约 20%，富集后另作复核。
- 刺激与机制对照
- 毒胡萝卜素诱导内质网应激；IFNγ、HLA 阻断、隔离接触及 CD3/CD28 免疫阳性对照。
- 免疫及细胞损伤检测
- CD25/CD69 流式，MSD 多因子检测、活细胞计数与 Apopxin 凋亡指标。
测量指标与分析
- CD4/CD8 T 细胞激活
- IFNγ/IL-2/IL-17/CXCL10
- β/α 细胞存活
- 细胞凋亡
- HLA 相关反应
将应激处理的目标细胞洗涤后共培养，激活信号扣除未刺激 PBMC 基线；用细胞类型、HLA 阻断和隔离接触检查反应特异性。
研究设计与结果
机制研究
- 研究设计
- 自体应激/未应激 β/α 比较及 HLA/接触条件；混合和富集细胞群复核。
- 测试范围
- 3 位 T1D 与 1 位非糖尿病供者；实际子实验及技术重复以各图记录，未合并为广泛药物集。
- 参照体系
- 未应激、IFNγ 条件、α 细胞及心肌细胞、自体/异体免疫细胞和免疫阳性对照。
- 研究结果
- 应激 β 细胞可引起自体 T 细胞激活和更明显细胞损失；HLA 阻断或隔离接触降低反应，β 富集后仍观察到同方向结果。
适用条件与研究局限
- 非糖尿病供者也出现激活，疾病特异性仍需进一步评价。
- iPSC 分化群体包含多种细胞，目标纯度与富集条件影响解释。
- 本研究主要为机制比较，未完成大规模治疗药物验证。
来源与原文
- Modeling Type 1 Diabetes In Vitro Using Human Pluripotent Stem Cells原始研究 · Cell Reports · 2020-07-14