ApoE4—Aβ 诱导神经免疫类器官的多指标药物评价
通过炎症分泌、NfL/GFAP 和细胞类型分开的脂质成像，评价 ApoE4—Aβ 诱导模型与工具化合物反应。
用途与模型
- 研究用途
- 阿尔茨海默病相关炎症、脂质和神经损伤表型研究，以及预处理候选化合物的比较。
- 模型与细胞来源
- iPSC 来源神经前体、内皮、间充质与小胶质细胞组装平面组织；神经/血管相关为 APOE3/3，小胶质来自各 1 位 APOE3/3 或 APOE4/4 供者。
- 方法版本
- 2026 年平面组织、24 小时至 7 天诱导及诱导前 1 小时给药的 3 天终点版本
- 实验形式
- 96 孔板的专有 PEG 水凝胶平面组织，约第 21–23 天开始刺激；急性 24 小时及持续至 7 天的表征。
材料与平台
- 细胞与基质
- 商业 iPSC 来源 NPC、EC、MSC 与小胶质细胞；Stem Pharm 专有 PEG 水凝胶。
- 诱导与对照
- 1 μg/mL 重组 ApoE 蛋白、5 μM Aβ；相应 ApoE3 与未刺激比较；LPS/IFN-γ 作为另一炎症体系。
- 工具化合物
- SB203580 10 μM、姜黄素 20 μM、IKK16 1 μM、塞来昔布 10 μM、TAK-242 1 μM，刺激前 1 小时加入，3 天终点。
- 检测
- IL-8、NfL、GFAP 培养液测量；IBA1、GFAP 与 LipidSpot 共定位成像；转录组、Aβ42/40 与 tau 指标用于另行表征。
测量指标与分析
- IL-8 分泌
- NfL 与 GFAP 释放
- 细胞类型分开的脂质积累
- 急性/持续炎症转录与 Aβ、tau 相关表征
药物组与相应溶剂对照比较，分别分析 LPS/IFN-γ 和 ApoE4—Aβ 条件；培养液中测量神经损伤标志，脂质成像按小胶质细胞和星形胶质细胞分别统计。
研究设计与结果
方法可行性研究
- 研究设计
- 先比较两种小胶质背景下刺激反应，再在 APOE3/3 体系比较 5 种工具化合物的预处理反应。
- 测试范围
- 药物分泌检测每条件 2–4 个类器官，药物脂质成像每条件 2 个；2 种小胶质细胞分别只有 1 位供者，非同基因背景。
- 参照体系
- APOE3/3 与 APOE4/4 小胶质来源、相应 ApoE 蛋白与 Aβ组合；两种诱导体系；各药物与 DMSO。
- 研究结果
- SB203580 在 ApoE4—Aβ 体系使 IL-8 降低超过 30%，NfL/GFAP 下降，小胶质脂质减少超过 50%；星形胶质脂质没有同样变化。两种小胶质的 IL-8 相似但 NfL 反应不同。
适用条件与研究局限
- 2 位供者背景不同，尚无多供者与同基因背景验证。
- 药物为诱导前预处理，不是已形成病理后的逆转实验。
- 尚未与患者药物反应配对；水凝胶配方专有，组学数据受控申请。
- ApoE4 诱导炎症的详细机制仍在研究；第 7 天 tau 量程超限不产生比值。