AOP 引导的铂类药物肾小管损伤检测
在二维人近端肾小管细胞中，组合活力、膜损伤、线粒体、活性氧及 NAG 检测。
用途与模型
- 研究用途
- 比较铂类药物的肾小管损伤过程，安排后续机制及暴露研究。
- 模型与细胞来源
- Cell4Pharma 条件永生化的人近端肾小管上皮细胞 ciPTEC；顺铂、卡铂与奥沙利铂。
- 方法版本
- 2026 年三种铂类药物 ciPTEC 多指标版本
- 实验形式
- 静态二维单层，药物特定浓度范围及 24/48/72 h；每项≥3 个生物重复、每次 3 个技术重复。
材料与平台
- 细胞与参照药物
- ciPTEC，三种铂类药物及匹配对照；各浓度范围先由活力预试验确定。
- 活力和损伤检测
- PrestoBlue、LDH 与 NAG 酶活性；不能将染料还原量直接写成细胞计数。
- 机制探针与参照
- JC-10 线粒体膜电位、CM-H2DCFDA 活性氧，CCCP/过氧化氢阳性参照。
测量指标与分析
- 代谢活力与 IC50
- LDH 释放
- 线粒体膜电位
- 活性氧
- NAG 酶活性
各药物按浓度、时间和匹配对照分析；对应 AOP 部分关键事件，没有完整定量事件关系模型。
研究设计与结果
机制研究
- 研究设计
- 三种铂类药物的多时间/多浓度细胞反应比较。
- 测试范围
- 3 种药物；≥3 次独立实验，每次 3 技术重复。
- 参照体系
- 匹配对照、CCCP 和过氧化氢参照；药物之间按各自浓度范围比较。
- 研究结果
- 顺铂活力 IC50 随 24/48/72 h 为 26.3/11.9/10.5 μM，线粒体和 ROS 较明显；卡铂需较高浓度，奥沙利铂反应介于两者。
适用条件与研究局限
- JC-10 红/绿比值方向在 Methods/Results 中不一致，实施需核对原数据归一化。
- NAG 活性不是已证实的溶酶体破裂；未直接测 DNA 加合物和器官衰竭。
- 单一静态细胞体系、急性≤72 h，未建立临床预测或完整 qAOP 验证。
来源与原文
- An AOP-guided in vitro platform for mechanistic screening of platinum-based nephrotoxicity原始研究 · NAM journal · 2026-07-03