原代小肠单层脂质预处理与脂蛋白相关药物转运
由原代肠类器官建立单层，比较脂质预处理后的脂蛋白分泌；在小鼠回肠与 Caco-2 中追踪卤泛群和 navitoclax 进入乳糜微粒富集组分的通透与比例。
用途与模型
- 研究用途
- 研究高度脂溶性药物与肠上皮分泌脂蛋白的关联，评价脂质制剂相关的体外转运变化。
- 模型与细胞来源
- 人十二指肠和小鼠回肠来源类器官衍生单层；Caco-2 C2bbe1 亚克隆。药物试验仅使用小鼠回肠与 C2bbe1。
- 方法版本
- 2025 年原代人十二指肠/小鼠回肠与 C2bbe1 比较版本
- 实验形式
- 3 μm 孔径 Transwell，胶原与 4% Matrigel 包被；原代 8 天（生长 4 天+分化 4 天），C2bbe1 培养 21 天。每个药物转运实验重复均汇合 3 块培养膜。
材料与平台
- 短时脂质预处理
- 2 mM 油酸、1 mM 2-油酰甘油（2-MO）、1 mM 牛磺胆酸盐与 1.36 mM 磷脂酰胆碱，pH 6.5，处理 4 小时后洗去。
- 药物追踪
- 卤泛群与 navitoclax 分别加入上侧新培养液，各为该条件饱和溶解度的 50%；追踪 2 或 4 小时，收集下侧培养液和上侧、细胞内药物。
- 组分分离与检测
- 超速离心获得乳糜微粒与极低密度脂蛋白富集组分；高效液相色谱定量药物。另测甘油三酯、载脂蛋白 B-48/B-100 和脂蛋白大小。
测量指标与分析
- 脂蛋白分泌方向与 apoB-48/B-100
- 甘油三酯输出
- 脂蛋白颗粒大小
- 各组分药物表观通透系数
- 各组分药物占给药量比例
- 脂蛋白所带药物占已转运药物比例
- 药物回收量
比较有无脂质预处理、原代与 Caco-2 及两个追踪时间；以药物定量分别计算组分通透、剂量比例和已转运药物的组分分布。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 原代人/小鼠单层与 Caco-2 比较脂蛋白分泌；小鼠回肠与 Caco-2 比较 2 种药物在脂质预处理后的转运。
- 测试范围
- 药物结果图 3 个实验重复，每个重复汇合 3 块单层培养膜；基因表达比较由 2 批单层各 2 个技术重复构成。
- 参照体系
- 无脂质、油酸及油酸+2-MO 条件；小鼠回肠与 Caco-2；2 与 4 小时追踪。
- 研究结果
- 乳糜微粒富集组分中卤泛群通透最高增加至小鼠 4.6 倍、Caco-2 为 1.6 倍；navitoclax 为 14.9 倍与 1.3 倍。小鼠 navitoclax 占给药量比例由 0.08% 增至 1.49% 且显著，卤泛群由 0.79% 至 1.45% 未显著。
适用条件与研究局限
- 药物试验未使用人十二指肠单层；人和小鼠原代材料均参与分泌比较。
- 乳糜微粒与极低密度脂蛋白为富集组分；装置没有淋巴内皮或淋巴流动。
- 脂质胶束的牛磺胆酸盐与磷脂酰胆碱比例为本试验条件；两种高度脂溶性药物构成当前药物范围。
- 动物淋巴结果来自文献讨论，未实施新的动物或临床外部验证。
来源与原文
- Primary small intestinal epithelia are physiological alternatives to the Caco-2 lymphatic transport model原始研究 · Molecular Pharmaceutics · 2025-11-10