PNPLA3 多细胞肝模型的代谢与 IL-6 干预分析
肝细胞、星状细胞和巨噬细胞共培养，比较脂毒环境下的代谢、炎症及 IL-6 信号干预效应。
用途与模型
- 研究用途
- 脂肪肝遗传易感性、细胞互作及抗炎候选机制研究。
- 模型与细胞来源
- hPSC 分化的肝细胞、静息星状细胞和巨噬细胞；PNPLA3 野生型与 I148M 同基因背景模型。
- 方法版本
- 2022 年 PNPLA3 WT/I148M 三细胞肝培养版本
- 实验形式
- 肝细胞/星状细胞共培养，巨噬细胞位于 Transwell；三者约 8:1:1，摇动平台促进培养液流动。
材料与平台
- 三类 hPSC 衍生肝细胞群
- 平台在 HUES8 与 iPSC-W3 背景可建立，具体遗传比较使用论文的同基因背景细胞。
- 细胞分离与代谢/免疫检测
- ASGR1 免疫磁分选用于区分细胞贡献；脂滴、TAG、葡萄糖、CK18/LDH 和细胞信号分别测量。
- IL-6 中和与 sgp130-Fc
- 比较整体 IL-6 阻断和反式信号干预，基因降低实验另作机制支持。
测量指标与分析
- 肝细胞脂滴/TAG
- 葡萄糖分泌与胰岛素响应
- 星状细胞激活
- 炎症细胞因子
- 细胞损伤
遗传背景、正常/脂毒环境及多细胞/单细胞条件分别比较，分离细胞用于定位代谢和炎症来源。
研究设计与结果
机制研究
- 研究设计
- 同基因背景疾病建模，原代与 hPSC 来源对照，并开展 IL-6 中和及选择性反式信号干预。
- 测试范围
- PNPLA3 WT/I148M 对照及对应细胞群；具体检测的独立重复数以原图和补充为准，现有比较主要采用特定细胞背景。
- 参照体系
- 健康环境、野生型、单/双细胞培养，以及未干预条件。
- 研究结果
- I148M 脂毒条件下脂质积累、胰岛素响应异常和星状细胞激活较强；IL-6 阻断降低相关代谢和激活指标。
适用条件与研究局限
- 主要用途是机制扰动；独立药物集和患者反应预测尚未验证。
- 详细培养和各指标重复数应核对完整规程及图注。
- hPSC 肝细胞部分 CYP 活性仍与原代细胞不同。
来源与原文
- IL6/STAT3 axis dictates the PNPLA3-mediated susceptibility to non-alcoholic fatty liver disease原始研究 · Journal of Hepatology · 2022-08-30