肿瘤与正常结直肠类器官的抗体高内涵筛选
将结直肠癌与正常黏膜类器官纳入抗体筛选，以多参数形态变化比较活性及组织选择性。
用途与模型
- 研究用途
- 双特异性抗体发现、候选复测及正常组织选择性比较。
- 模型与细胞来源
- 原发和肝转移结直肠癌 PDO，以及邻近正常黏膜类器官；各模型的生长因子依赖分别保留。
- 方法版本
- 2022 年 WNT×RTK 双抗和多参数形态评分版本
- 实验形式
- BME2 中的 384 孔三维培养、7–9 天筛选、高内涵 Z 堆栈成像及多参数形态评分。
材料与平台
- 模型与基质
- 肿瘤/正常结直肠 PDO、Cultrex BME2、EGF/HRG 或 WNT 条件。
- 抗体与参照
- WNT×EGFR/HER3 抗体库、MCLA-158、西妥昔单抗及不结合靶点的 TT 对照。
- 成像和分析
- ImageXpress、Ominer/KNIME、Spotfire；细胞核、腔体及类器官形态特征。
测量指标与分析
- 多参数形态响应
- 类器官生长抑制
- IC50
- Z′ 因子
- 正常/肿瘤选择性
检查分割、边缘效应和重复孔，500 个候选形态特征中选择 3–20 个区分参照条件，按欧氏距离归一化评分。
研究设计与结果
药物集评价
- 研究设计
- 3 个初筛 PDO 测超过 500 种双抗；28 种候选在扩展模型和正常黏膜中复测。
- 测试范围
- 样本库含 61 个原发和 11 个肝转移 PDO，来自 68 位患者；31 位有正常黏膜模型。二筛为 22 个肿瘤及 1 个正常模型，初/二筛各用重复孔。
- 参照体系
- 生长因子与撤除条件、TT 抗体、单臂/单抗参照和正常黏膜 PDO。
- 研究结果
- 初筛 Z′ 为 0.33±0.22（n=8）；MCLA-158 抑制 52% 的所测 CRC 模型生长，部分 KRAS 变异模型也有响应。后续比较显示肿瘤与正常黏膜的作用不同。
适用条件与研究局限
- 培养成功率 72.7% 是建库指标；形态评分和模型响应比例分别属于筛选结果。
- 原主文与方法对初筛抗体浓度记载不同，具体复现需按原批次确认。
- 正常模型和肿瘤库覆盖不同；此研究未开展前瞻性患者疗效预测。