卵巢癌类器官与 iPSC 来源 NK 细胞的逐个凋亡成像
在 2 个患者来源卵巢癌类器官（PDO）中，比较诱导多能干细胞（iPSC）来源自然杀伤（NK）细胞共培养与类器官单独培养，连续测量各类器官的凋亡阳性投影面积，并分析群体内的反应差异。
用途与模型
- 研究用途
- 研究 NK 细胞作用下的类器官个体反应与低凋亡亚群。
- 模型与细胞来源
- 2 个患者来源 PDO：网膜取材的卵巢高级别浆液性癌 PDO-1、左卵巢黏液性癌 PDO-2；效应细胞为 iPSC 分化的 iNK，经过 K562 功能评价。
- 方法版本
- 2025 年 2 个卵巢癌 PDO 的约 11 小时 iNK 共培养成像研究
- 实验形式
- 96 孔成像共培养；每孔约 30000 个 iNK、1500 个完整类器官，20:1 按 iNK 数与类器官单位数计算；共同培养液含 5% Cultrex BME。主要定量每 15 分钟成像，最长约 11 小时。
材料与平台
- 双方共同培养条件
- iNK 与卵巢类器官培养液按 1:1 混合；材料比较包括类器官培养液、iNK 培养液与混合条件。
- 模型与效应细胞
- 2 个卵巢癌 PDO 与同一大批冻存后复苏的 iNK；K562 为效应细胞功能比较靶细胞。
- 成像检测
- CellTracker Orange CMRA 标记类器官，iNK 荧光标记，CellEvent caspase-3/7 信号用于凋亡测量；Opera Phenix 成像和 Harmony 图像分析。
测量指标与分析
- 每个类器官的 caspase-3/7 阳性面积比例
- 各时点出现凋亡的类器官比例
- 类器官大小与凋亡面积的关系
- 培养液比较中的 NK 表型/存活及 PDO ATP 检测信号
多层图像合并为最大投影，凋亡阳性面积除以同一类器官的总投影面积。贝叶斯双组分 Beta 混合模型划分反应亚群，Gompertz 模型拟合低凋亡比例；基于同批数据的模型拟合用于描述群体异质性。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 比较共培养与 PDO 单独培养，并比较支持双方存活的培养液条件。
- 测试范围
- 2 个 PDO；主要成像每个 PDO 有 3 次独立实验，每个条件追踪数百个类器官。
- 参照体系
- 无 iNK 的单独培养对照及不同培养液。
- 研究结果
- 共培养凋亡信号上升，个体反应不同；合并模型估计持续低凋亡对象为 6.2%（95% 可信区间 4.9%–7.5%）。
适用条件与研究局限
- 患者模型仅 2 个，亚型不同。
- 效靶比的靶方为完整类器官；类器官内的细胞数未用于这一比例。
- 低凋亡信号为短时体外观察，机制和临床结局未在本研究确立。
来源与原文
- Large scale quantification of natural killer cell-induced apoptosis in patient-derived organoids reveals intratumoral response heterogeneity原始研究 · npj Precision Oncology · 2025-12-26