NAMs新方法学前沿

三维打印芯片内肾类器官与内皮细胞共培养

用灌流芯片与肾脏基质支持类器官内部的毛细血管样结构形成。

用途与模型

研究用途
肾类器官血管化的构建与结构表征,供后续成熟及药物测试模型研究。
模型与细胞来源
LUMC0031iCTRL08 人诱导多能干细胞分别分化为后肾间充质和输尿管芽祖细胞,再共同形成肾类器官;与人脐静脉内皮细胞共培养。
方法版本
2026 年 MM/UB 类器官、猪肾基质与预铺内皮版本
实验形式
2 条圆截面通道、3 个中央凝胶腔的 PDMS 芯片;摇摆产生间歇灌流,每腔容纳 1 个类器官。

材料与平台

芯片与基质
Pluronic F-127 可去除模板、PDMS;部分消化的猪肾脱细胞基质 ddECM。
细胞及培养比较
HUVEC 与 MM/UB 肾类器官;比较 ddECM、Geltrex、无凝胶及 3 种培养基配方。
检测
PrestoBlue 代谢信号、CD31/LTL/GATA3/PODXL 染色、共聚焦成像、基因表达与基质蛋白质组分析。

测量指标与分析

  • 内皮代谢信号
  • 类器官三维结构
  • CD31 阳性面积
  • 血管样分支与肾结构的空间位置

先选择共同培养基和凝胶,再比较预铺内皮芯片加入类器官前后的 CD31 阳性结构,并以静态类器官和无类器官芯片作参照。

研究设计与结果

方法可行性研究

研究设计
内皮先在芯片内培养 7 天,加入分化第 14 天的类器官,共培养 5 天;静态类器官及无类器官的内皮芯片作为对照。
测试范围
同一芯片的 3 个凝胶腔各放 1 个类器官;培养基代谢比较 n=9,基因表达图标注 N=3、n=1,图注未进一步说明两个计数对应的重复层级。
参照体系
ddECM 与 Geltrex/无凝胶;3 种培养基;静态培养和缺少类器官的内皮芯片。
研究结果
ddECM 中类器官保持三维结构;共培养后 CD31 阳性分支伸向类器官外周和内部,并靠近 LTL 与 PODXL 阳性区域。无类器官芯片的 CD31 阳性面积降至 39.01%,加入类器官条件下为 72.90%。

适用条件与研究局限

  • 研究表征早期毛细血管样结构,尚未直接验证这些分支的腔内灌流或肾小球滤过。
  • 采用 1 个 hiPSC 背景及 HUVEC,使用猪肾来源基质。
  • 本研究没有药物暴露或肾毒性预测试验。

来源与原文

  1. 3D printed chip as platform to vascularize hiPSCs-derived kidney organoids原始研究 · Biomedical Microdevices · 2026-06-05

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