肝内胆管癌类器官的吉西他滨及 TPM2 功能比较
用 2 位患者的类器官比较单药反应，并在其中 1 个模型评价 TPM2 的功能作用。
用途与模型
- 研究用途
- 候选基因与吉西他滨反应的体外药效研究。
- 模型与细胞来源
- 2 位晚期患者的 ICCO1/ICCO2；TPM2 去除比较在 ICCO2 完成。
- 方法版本
- 2026 年 ATP 曲线与 5 天活死染色版本
- 实验形式
- 96 孔 Matrigel 培养，恢复 24–48 小时后加药；浓度曲线暴露至少 72 小时，活死比较为 10 μM、5 天。
材料与平台
- 培养体系
- Advanced DMEM/F12、Matrigel、胆管癌类器官补充成分。
- 药物与检测
- 吉西他滨、溶剂参照、CellTiter-Glo 3D、Calcein-AM/PI 染色。
- 功能及标志
- TPM2 去除模型与非靶向参照；蛋白和表达检测，观察胆管、上皮—间质转变及 Notch 相关标志。
测量指标与分析
- 相对 ATP 存活曲线与 IC50
- 活/死荧光面积及类器官面积
- TPM2、Notch 和上皮—间质转变相关标志
浓度—反应以溶剂参照归一化，另用活死及面积检测比较固定剂量；3 次独立实验，类器官/视野在各实验内量化。
研究设计与结果
机制研究
- 研究设计
- 两患者药物曲线及同一较低敏感模型中两套 TPM2 功能比较。
- 测试范围
- ICCO1/ICCO2 两模型；药敏曲线独立重复 3 次，功能比较主要在 ICCO2。
- 参照体系
- 不同模型、TPM2 去除与非靶向参照、吉西他滨与溶剂。
- 研究结果
- IC50 约为 0.754/1.569 μM；去除 TPM2 后吉西他滨组活细胞面积比例减少并伴随 Notch/EMT 标志改变。
适用条件与研究局限
- 功能结果仅来自 1 个患者来源模型，尚无更大模型集合的验证。
- 模型缺少成纤维细胞和完整原位基质，间质来源 TPM2 的直接作用尚未检验。
- 患者接受联合灌注化疗，体外曲线为吉西他滨单药。
- 标志变化支持关联，具体通路因果次序仍需功能研究。
来源与原文
- Fibroblast-associated TPM2 links cell-matrix remodeling to EMT-Notch signaling and gemcitabine resistance in intrahepatic cholangiocarcinoma原始研究 · Cancer Biology & Therapy · 2026-09-21