人肠上皮单层炎症刺激与双向药物转运
由 3 位供者的十二指肠类器官建立二维单层，以 4 种炎症因子处理 48 小时，再结合转运蛋白信使 RNA（mRNA）与呋喃妥因、地高辛双向通透评价炎症影响。
用途与模型
- 研究用途
- 测量炎症环境对肠道药物外排的影响，为口服药物暴露研究提供体外数据。
- 模型与细胞来源
- 3 位女性供者的十二指肠隐窝来源类器官先在 Matrigel 中扩增，再转为胶原 IV 支持的二维上皮单层；供者 27、64 和 70 岁。
- 方法版本
- 2025 年 3 位十二指肠供者与 96 孔板/Transwell 版本
- 实验形式
- 96 孔板用于转运相关 mRNA；0.4 μm 孔径 Transwell 用于双向药物通透。单层分化 14 天后开始 48 小时处理。
材料与平台
- 炎症处理
- 白细胞介素 1β（IL-1β）、白细胞介素 6（IL-6）、肿瘤坏死因子 α（TNF-α）和干扰素 γ（IFN-γ），单独或 4 种合用；96 孔板每种 0.1、1 或 10 ng/mL，Transwell 上下侧每种 1 ng/mL。
- 参照药物与抑制剂
- 10 μM 呋喃妥因用于乳腺癌耐药蛋白（BCRP）转运，50 nM 氚标记地高辛用于 P-糖蛋白（P-gp）；Ko143 和 tariquidar 各 10 μM。处理液洗去后预孵育 15 分钟，再测量 60 分钟双向通透。
- 检测
- 呋喃妥因用液相色谱–串联质谱定量，地高辛用液体闪烁计数；另测转运相关 mRNA、跨上皮电阻、乳酸脱氢酶释放和培养液炎症因子浓度。
测量指标与分析
- 转运相关 mRNA
- 双向表观通透系数
- 呋喃妥因与地高辛外排比
- 跨上皮电阻
- 乳酸脱氢酶释放
- 培养液炎症因子浓度
以双向表观通透系数计算外排比，按供者和处理条件比较；结合抑制剂、mRNA、屏障与细胞损伤指标解释各药物的结果。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 无刺激、4 种因子单独或合用比较；药物通透另设对应转运抑制剂。
- 测试范围
- 3 位十二指肠供者；药物通透每条件 3 个技术重复，结果按供者呈现。
- 参照体系
- 无刺激对照、单因子/组合刺激以及 Ko143 或 tariquidar 抑制条件。
- 研究结果
- 呋喃妥因外排比由 4.6 降至 IL-1β、IL-6、TNF-α 和 IFN-γ 处理的 2.1、2.4、2.6 和 0.9；地高辛外排比约 2，炎症处理未显著改变。
适用条件与研究局限
- 材料来自 3 位女性的十二指肠；未比较其他肠段。
- P-gp 的 mRNA 下降伴随地高辛外排未显著改变；TNF-α 与 IFN-γ 下 BCRP 的 mRNA 和呋喃妥因外排变化也不同，具体调节机制未确定。
- 部分处理使 2 位供者乳酸脱氢酶释放轻度增加；培养液因子浓度在 48 小时内发生变化。
- 作者提出药代模型用途，本研究未实施患者吸收预测验证。
来源与原文
- Effect of proinflammatory cytokines on intestinal drug transporters in human enteroid monolayers原始研究 · Drug Metabolism and Disposition · 2025-11-21