手动膜片钳 hERG 抑制试验
测量药物对 hERG 电流的抑制及浓度依赖性，研究实验室间结果差异。
用途与模型
- 研究用途
- 评价延迟复极与 QT 间期延长相关的离子通道作用。
- 模型与细胞来源
- 稳定表达 hERG1a 的 HEK293 或 CHO 细胞；CHO 为仓鼠来源细胞。
- 方法版本
- 2025 年多实验室研究所用手动全细胞记录方案
- 实验形式
- 单细胞电生理记录
材料与平台
- 过表达细胞系
- 5 个实验室分别使用 HEK293 或 CHO 细胞。
- 记录与给药系统
- 手动全细胞膜片钳、灌流或移液给药系统；研究另设 LC-MS/MS 药物浓度检测。
测量指标与分析
- hERG 电流抑制率
- IC50 与 pIC50
- 实际药物暴露浓度
拟合浓度—抑制关系；比较系统性差异和残余变异。
研究设计与结果
多实验室研究
- 研究设计
- 统一电压波形和内外液后开展跨实验室比较。
- 测试范围
- 5 个实验室，分两阶段测试 28 种药物；1 个实验室未参加第二阶段。
- 参照体系
- 实验室间 hERG 抑制效力与部分药物的重复测试。
- 研究结果
- 混合效应分析估计的残余 IC50 变异约 4.9 倍。
适用条件与研究局限
- 细胞系、药物来源和给药方式未全部统一。
- 变异估计来自汇总分析，具体药物与实验室的变异仍有差别。
监管文件关联
ICH E14/S7B Q&A 2.1
国际协调 · 指南最佳实践 ·
规定离子通道试验的最佳实践，用于文件描述的综合风险评价及临床 QT 数据解释场景。
来源与原文
- Multi-laboratory comparisons of manual patch clamp hERG data generated using standardized protocols and following ICH S7B Q&A 2.1 best practices原始研究 · Scientific Reports · 2025-08-16
- E14/S7B Questions and Answers官方文件 · 2022-02-21