SOX17 可调内皮心血管类器官的药物与损伤测试
通过诱导 SOX17 与调整起始细胞比例，生成有内皮结构的心血管类器官，测试多柔比星、冷冻损伤和异丙肾上腺素反应。
用途与模型
- 研究用途
- 在同一多细胞模型中观察心肌毒性、损伤恢复和 β 肾上腺素能反应。
- 模型与细胞来源
- H9 人胚胎干细胞及其 AAVS1 位点可诱导 SOX17 过表达克隆；以心肌细胞、内皮和心外膜相关结构组成。
- 方法版本
- 2026 年 H9/SOX17-H9 2:1、内皮/心肌/心外膜分化版本
- 实验形式
- 20 μL 悬滴每滴约 2,000 个细胞形成胚状体，转入 96 孔 U 底板；H9:SOX17-H9=2:1；第 6 天添加 CHIR99021 促进心外膜分化。
材料与平台
- 细胞和调节
- H9、SOX17-H9 C3 克隆；CHIR99021、Wnt-C59、B27；多西环素在第 7–10 天诱导。
- 测试药物和损伤
- 多柔比星 1/5 μM；液氮冷却针接触类器官 5 秒；损伤后卡托普利；异丙肾上腺素 100 μM。
- 测量
- 明场搏动录像、Fluo-4 AM 钙成像、CellTiter-Glo 2.0 和 PI 染色；VE-cadherin、WT1、cTnT、α-actinin 和 vimentin 免疫染色。
测量指标与分析
- 可见搏动类器官比例与搏动频率
- 钙瞬变峰值和半峰持续时间
- ATP 发光信号
- 心肌与内皮/心外膜标志
- 损伤后 α-actinin 与 vimentin 信号
先比较起始 H9/SOX17-H9 比例及组织结构，再分别完成药物、冷冻损伤/恢复和 β 受体激动实验；各终点按自己的独立类器官分母统计。
研究设计与结果
方法可行性研究
- 研究设计
- 多柔比星 1/5 μM 连续 3 天、每日换液后继续维持；第 15 天冷冻损伤±卡托普利；异丙肾上腺素 100 μM 处理 3 天。
- 测试范围
- 细胞均来自 H9 及其编辑克隆。多柔比星各终点采用 6–14 个独立类器官，冷冻损伤各终点 4–13 个，异丙肾上腺素各终点 6–14 个。
- 参照体系
- H9、SOX17-H9 及 2:1 混合；药物未处理；冷冻损伤与损伤后卡托普利。
- 研究结果
- 内腔样结构在 7/11 个类器官出现。5 μM 多柔比星使可见搏动减少，并明显降低 ATP 发光信号；冷冻损伤后卡托普利组保留部分不规则搏动和较高活性；异丙肾上腺素使钙瞬变峰值由 1.14 升至 1.67 而搏动频率近似。
适用条件与研究局限
- 主要细胞来源为 H9；研究未开展临床药物预测准确率或跨供者验证。
- Fluo-4 记录钙瞬变，文章以 APD50 命名相关持续时间；没有据此单独采集跨膜动作电位。
- 心血管分化方法段列多西环素 2 μM，结果段概述后续实验使用 3 μM；两处浓度描述不同。
- 多柔比星活性测量的结果段写 6 天，方法写 3 天处理后继续培养；持续给药时间与活性测量时间的表述不同。
- 模型存在少量其他细胞；细胞间相互作用尚未详细解析。
来源与原文
- Cardiovascular Organoids With Adjustable Endothelial Composition via SOX17‐Engineered hPSCs原始研究 · Biotechnology and Bioengineering · 2026-06-21