结直肠癌类器官—成纤维细胞共培养药物反应检测
通过肿瘤和基质的分别标记，比较类器官单独/共培养药物曲线及基质相关耐药。
用途与模型
- 研究用途
- 结直肠癌基质对药物反应的影响、分型差异及增敏组合筛选。
- 模型与细胞来源
- 30 例建立类器官—基质库，主要药物测试 29 个模型；优先使用自体 CAF，缺失时采用同 CMS 分型的异体 CAF。
- 方法版本
- 2023 年配对基质库与双荧光素酶版本
- 实验形式
- 96 孔 Matrigel 直接共培养，肿瘤接种量先按成模型数校准；培养 3 天后改用减少生长因子的条件，给药 6 天。
材料与平台
- 肿瘤类器官与 CAF
- 患者来源模型与癌相关成纤维细胞；单独、共培养及交换基质比较。
- 肿瘤/基质活性检测
- 肿瘤 Firefly 与 CAF Renilla 荧光素酶检测；ONE-Glo EX/Dual-Glo 分别检测两类细胞。
- 药物及对照库
- 5-FU、奥沙利铂、SN-38 与吉非替尼曲线；耐药模型另筛 186 个探针和 106 个阴性对照。
测量指标与分析
- 肿瘤及 CAF 活性
- IC50
- 标准化药物曲线 AUC
- 共培养/单独培养相对 AUC
- 基质药物影响分数
各自荧光信号按溶剂对照标准化，分别拟合曲线；结合生长、CMS 分型、单独/共培养及基质交换解释效应。耐药模型的组合命中再作浓度复测。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 29 个模型的 4 种药物单独/共培养比较；O14/O23 耐药模型筛选与组合复测。
- 测试范围
- 主要药物试验每条件 3 个孔；探针筛选每条件 2 个重复，独立患者数与孔数分别统计。
- 参照体系
- 无 CAF、不同来源 CAF、溶剂和阴性探针对照；双信号区分肿瘤与基质效应。
- 研究结果
- CAF 影响随模型/药物变化；CMS4 共培养对 SN-38 与吉非替尼更耐受。MET 抑制可使所测耐药共培养模型对吉非替尼重新敏感。
适用条件与研究局限
- 部分共培养采用异体 CAF，来源配对须逐模型保留。
- 组合复测集中于特定耐药模型，缺少独立临床获益验证。
- 细胞密度和基质促生长会影响反应，须保持预先校准的比较条件。
来源与原文
- Colorectal Cancer Organoid–Stroma Biobank Allows Subtype-Specific Assessment of Individualized Therapy Responses原始研究 · Cancer Discovery · 2023-07-25