乳腺癌类器官芯片的 CAR-T 浸润与细胞因子检测
从血管侧灌流 CAR-T 细胞，同时观察肿瘤浸润、生长变化和流出液中的细胞因子。
用途与模型
- 研究用途
- 实体瘤 CAR-T 的抗原依赖作用和局部炎症反应研究。
- 模型与细胞来源
- MDA-MB-231 聚集体或转移性乳腺癌 PDO；原代微血管内皮，部分配置改为与 T 细胞同供者的 hiPSC 内皮。
- 方法版本
- 2024 年 ROR1、内皮屏障和 4 位患者 PDO 版本
- 实验形式
- PDMS/玻璃芯片、葡聚糖水凝胶肿瘤腔及 PET 膜；短期 T 细胞灌流后持续培养观察 8 天。
材料与平台
- 肿瘤与内皮
- 乳腺癌细胞/4 位患者 PDO、葡聚糖水凝胶、原代或 hiPSC 内皮。
- T 细胞参照
- ROR1 CAR-T、同供者未转导 T 细胞及 CD19 CAR-T；非恶性成纤维细胞球。
- 功能测量
- 荧光 T 细胞/肿瘤成像、面积和流出液细胞因子定量。
测量指标与分析
- 肿瘤内 T 细胞荧光
- PDO 面积变化
- IL-2/IL-6/IL-10
- TNF-α/IFN-γ
- 颗粒酶 B
按单个 PDO/肿瘤腔分析面积与 T 细胞信号，按独立芯片统计流出液和时间序列；高/低 ROR1 及不同 T 细胞参照分开。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- ROR1 高/低 PDO 与细胞系参照，比较浸润、肿瘤生长及局部细胞因子。
- 测试范围
- 4 位患者作为概念验证；主要图 PDO 分析为 14–20 个对象/3–4 芯片，面积为 18–24 个腔/3–4 芯片，细胞因子为 3–4 芯片。
- 参照体系
- 未转导 T、CD19 CAR-T、ROR1 阴性非恶性球及高/低抗原 PDO。
- 研究结果
- 高 ROR1 PDO 的 CAR-T 浸润约为低 ROR1 的 9 倍且生长受限；低 ROR1 PDO 仍继续生长。细胞因子响应随靶抗原和 T 细胞条件变化。
适用条件与研究局限
- T/内皮同供者配置中，肿瘤仍来自不同患者，存在基础异体反应。
- 流出液代表局部条件；临床 CRS 风险和疗效尚无大队列验证。
- 细胞工程、精确细胞因子测定规程及完整患者资料需查原 STAR Methods/补充。
来源与原文
- Breast cancer-on-chip for patient-specific efficacy and safety testing of CAR-T cells原始研究 · Cell Stem Cell · 2024-05-15