NAMs新方法学前沿

膀胱癌组织切片的药物暴露与细胞表型分析

短期培养患者新鲜组织片,药后用多参数流式分析存活细胞组成和上皮标志变化。

用途与模型

研究用途
不同药物对膀胱癌存活细胞群及标志表达的离体比较。
模型与细胞来源
伯尔尼独立患者队列:10 份未治疗组织作初始细胞表征,13 份组织进入离体药物比较。
方法版本
2026 年膜支撑 3 天培养及药后流式版本
实验形式
约 1 mm 组织片置于 0.4 μm 膜支撑的六孔 Transwell;多数药物条件培养 3 天,BLC180 为 5 天。

材料与平台

组织与支撑
患者手术或经尿道切除的新鲜组织,ThinCert 膜支撑培养。
药物比较
化疗及 EGFR/FGFR 抑制剂,具体组别根据组织量选择。
组织表征
HE、Ki-67 染色与多参数流式;原组织和未治疗培养片并行比较。

测量指标与分析

  • 存活上皮/免疫/间质/内皮细胞组成
  • 存活 CD45 阴性 EpCAM 阳性群中的上皮表型
  • EGFR 高表达基底样群比例
  • 组织结构与 Ki-67 染色

药后将组织片分散为细胞,按存活及上皮标志筛选;FlowSOM 聚类形成 6 个上皮群,再比较各药物条件中的群比例。

研究设计与结果

实验条件比较

研究设计
新鲜组织与药后组织片的细胞群及结构比较。
测试范围
13 份组织药物试验,每个培养条件至少 3 个组织片。
参照体系
新鲜组织、未治疗培养片与各药物组;按肌层浸润和非肌层浸润两类比较。
研究结果
肌层浸润样本中的 EGFR 高表达基底样群在部分靶向药条件下降低,部分化疗条件下相对增加;组织片保留主要结构及多种细胞组成。

适用条件与研究局限

  • 3 或 5 天短期离体观察,尚未检验长期选择与患者治疗预测。
  • 细胞群比例基于药后存活细胞,未给出原始全部细胞的绝对杀伤量。
  • 每个组织的药物组受可用材料限制,13 份组织没有全部测试同一药物面板。

来源与原文

  1. Bridging phenotype and function in bladder cancer using immuno-competent organoids and ex vivo drug screening原始研究 · Journal of Experimental & Clinical Cancer Research · 2026-04-01

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