流动培养 ARPKD 肾类器官的囊肿药物分析
以流动刺激形成远端肾单位扩张，结合三维成像和损伤标志评价候选干预。
用途与模型
- 研究用途
- 常染色体隐性多囊肾的囊肿机制与候选药物研究。
- 模型与细胞来源
- H9 来源 PKHD1 不同基因型肾类器官；患者来源 iPSC 用于静态模型相关比较。
- 方法版本
- 2022 年 PKHD1 背景与机械感知研究
- 实验形式
- PDMS/玻璃毫米级流路与明胶—纤维蛋白基质；流动培养至分化第 35 天。
材料与平台
- 细胞与基质
- H9 来源 PKHD1 类器官、明胶、纤维蛋白与 Geltrex 培养背景。
- 成像与分析
- 三维组织成像、Imaris 管径/体积分析、KIM-1 和 γH2AX 损伤指标。
测量指标与分析
- 远端肾单位管径与体积
- KI67 阳性比例
- KIM-1 和 γH2AX
- cAMP 与信号变化
按肾单位标志分别量化扩张；药物作用与静态/流动及遗传背景比较。
研究设计与结果
实验条件比较
- 研究设计
- 通路筛选后评价 RAC1/FOS 等候选干预，检测囊肿抑制与损伤。
- 测试范围
- H9 及所列 PKHD1 基因型模型的体外试验；4 位患者肾样本用于靶点组织表达核对，未用于药物临床响应验证。
- 参照体系
- PKHD1 杂合/缺失、静态/流动、forskolin、药物及相应对照。
- 研究结果
- 流动条件下 PKHD1 缺失模型以远端扩张为主；T-5224、R-naproxen 和 R-ketorolac 在所测条件降低扩张与增殖，S-naproxen 未有同等作用。
适用条件与研究局限
- R/S 异构体与受测浓度分别保留；论文的候选药物结果未证明患者治疗效果。
- 用于干预评价的 H9 背景与患者来源比较材料分别记录。
来源与原文
- Organoid-on-a-chip model of human ARPKD reveals mechanosensing pathomechanisms for drug discovery原始研究 · Science Advances · 2022-09-21